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分裂酵母全遺伝子ライブラリーを用いた核-細胞質間輸送メカニズムの解明

使用裂殖酵母全基因库阐明核-细胞质运输机制

基本信息

批准号：
15710152
负责人：
八代田陽子
金额：
$ 3.07万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2005
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15710152/
关键词：
分裂酵母核-細胞質間輸送

项目摘要

分裂酵母の13個のインポーチンβスーパーファミリータンパク質のうち、Pse1(別名Sal3)の関与する核-細胞質間輸送についての解析を行った。このタンパク質をコードする遺伝子破壊株は温度、熱ショック、カルシウムイオン、紫外線照射、酸化剤などの環境ストレスに対し、顕著な感受性を示し、また胞子形成不全の表現型を示した。次に、定常状態でPse1により輸送されるタンパク質の網羅的同定を行った。出芽酵母および動物細胞のPse1ホモログはタンパク質の核移行に関与すること知られているため、分裂酵母Pse1も核外移行より核移行に主に関わるであろうと想定し、分裂酵母のYFP融合型遺伝子ライブラリーのうち、まず、核および核小体に局在するタンパク質をコードする遺伝子約1,500個について、それらがpse1遺伝子破壊株中で発現するような株を作製し、野生型株での局在との違いを観察したところ、野生型株では核小体に局在したRNA結合タンパク質がpse1遺伝子破壊株では核小体に存在できず、また野生型株において核局在を示す減数分裂時の遺伝子組み換えに必要なタンパク質がpse1遺伝子破壊株では細胞質に局在することがわかった。さらに、野生型株では細胞質局在を示すリボソームタンパク質について同様の局在観察を行ったところ、pse1遺伝子破壊株ではその多くが核局在を示した。これはリボソームタンパク質の核外輸送に関わるタンパク質の核移行にPse1が関与していることを示唆する。熱ショック応答転写因子Hsf1とカルシウムイオン応答転写因子Prz1のそれぞれのストレス存在下でのpse1遺伝子破壊株での局在変化を観察したが、野生型株と同等であったので、pse1遺伝子破壊株の示す熱ショック及びカルシウムイオン感受性はHsf1やPrz1を介さない経路から起因するものであると示唆された。

The 13-part DNA sequence of fission yeast, Pse1 (alias Sal3), is related to the analysis of nucleus-cytoplasmic transport. The phenotype of the plant with incomplete spore formation is indicated by temperature, heat, humidity, ultraviolet radiation, acidification and environmental factors. In the second and steady state, Pse1 is the same as the transport network. Pse1 of budding yeast and animal cells are involved in nuclear migration of the cytoplasm, and Pse1 of splitting yeast is involved in nuclear migration of the cytoplasm. There are about 1,500 fusion genes in the YFP fusion gene of splitting yeast. In the wild type strain, the nucleosomes are present in the RNA binding sites. In the wild type strain, the nucleosomes are present in the RNA binding sites. In wild-type plants, the nucleus is present in the cytoplasm of the daughter group during meiosis. In addition, wild-type strains are shown to have multiple cytoplasmic sites in the cytoplasm, while wild-type strains are shown to have multiple cytoplasmic sites in the cytoplasm. This is the first time that the nuclear transport of nuclear materials has been demonstrated. In the presence of a heat response factor Hsf1, a heat response factor Prz1, and a heat response factor Prz1, the heat response factor Prz1 and the heat response factor Prz 1 are detected in the process of transformation of the plant, and the heat response factor Prz1 is detected in the wild-type plant.