マウス先天欠如歯に関与する染色体領域の特定

小鼠先天性牙齿缺失涉及的染色体区域的鉴定

• 批准号: 15791227
• 负责人: 清水 武彦
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Nihon University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15791227/
• 关键词: 先天欠如歯; ELマウス; 第三臼歯; コンジェニックマウス; 遺伝子マッピング

これまでに第三臼歯の先天欠如を100%有する近交系マウスEL/Sea (EL)と野生型マウスMSM/Ms (MSM)の交配によりF1,2マウスを作製し、遺伝様式が常染色体劣性であること、歯欠損の遺伝要因を染色体3番のD3Mit106からD3Mit260までの約18cM領域に限定したことを報告した。本研究ではELおよびMSMを用い、MSMをドナーとし、MSMの染色体3番のD3Mit106からD3Mit260までの領域を、レシピエントであるELに導入するコンジェニックマウスを作製した。ELにMSMを交雑しF1をとり、F1をELに戻し交配をし、N2を10頭得た。これらのN2を生かしたまま尾からDNAを調整し、PCR-SSLPマーカーを用いた遺伝子型タイピングにより目的とする染色体3番の領域をヘテロ型にもった個体を選別した。このN2個体を用いて再びELに戻し交配をし、得られたN3世代に対し、上記操作を6回繰り返し、N7世代を得た。スピードコンジェニック法を用いたことにより、N7世代では染色体3番の目的以外の領域は99.9%以上ELホモ型となった。N7世代マウスを8週齢で安楽死させ上下顎骨を採取し、観察標本を作製した。実体顕微鏡下で第三臼歯の有無を評価し、染色体3番の目的領域がヘテロ型では第三臼歯が存在し、ELホモ型では歯が欠如したという結果を得、D3Mit106からD3Mit260までの約18cMの領域に原因遺伝子が存在することを証明した。さらにN7,N8世代マウスでD3Mit106からD3Mit260までの問で染色体組み換えを生じたマウスを交配に用い、N9世代を得た。D3Mit13からD3Mit25までの約4cMの領域がヘテロ型N9では第三臼歯が存在し、ELホモ型N9では歯が欠如したという結果を得、この領域に欠如歯の原因遺伝子が存在することを明らかにした。

こ れ ま で に third mortar 歯 の congenital owe such as を 100% す る inbred line マ ウ ス EL/Sea (EL) と wild-type マ ウ ス among MSM/Ms (among MSM) の mating に よ り F1, 2 マ ウ ス を as し, heritage 伝 others type が autosomal recessive で あ る こ と, 歯 owe damage の heritage 伝 by を chromosome 3 times の D3Mit106 か ら D3Mit260 ま で の about 18 cm field に qualified し た こ と を report し た. This study で は EL お よ び among MSM を い, among MSM を ド ナ ー と し, among MSM の chromosome 3 times の D3Mit106 か ら D3Mit260 ま で の を, レ シ ピ エ ン ト で あ る EL に import す る コ ン ジ ェ ニ ッ ク マ ウ ス を cropping し た. EL に among MSM を pay 雑 し F1 を と り, F1 を EL に 戻 し mating を た し, N2 を 10 head. Born こ れ ら の N2 を か し た ま ま tail か ら を adjust し DNA, PCR - SSLP マ ー カ ー を with い た heritage 伝 sub-type タ イ ピ ン グ に よ り purpose と す る chromosome 3 times の field を ヘ テ ロ type に も っ た individual を choose don't し た. こ の N2 individual を with い て again び EL に 戻 し mating を し, ら れ た N3 generation に し seaborne, written を 6 back to operation Qiao り return し た, N7 を from generation to generation. ス ピ ー ド コ ン ジ ェ ニ ッ を ク method with い た こ と に よ り, N7 generation で は chromosome 3 times の purpose outside は の field more than 99.9% of EL ホ モ type と な っ た. The upper and lower jawbones of the N7 generation 齢で ウスを8 weeks 齢で Anraku death させ を specimens of <s:1> and 観 examination を were taken for making た た. Be body 顕 micromirror で third mortar 歯 の presence of を review 価 し, chromosome 3 times の purpose field が ヘ テ ロ type で は third mortar 歯 が し, EL ホ モ type で は 歯 が owe such as し た と い う results, D3Mit106 を か ら D3Mit260 ま で の cause of about 18 cm に の field but 伝 が exist す る こ と を prove し た. さ ら に N7, N8 generation マ ウ ス で D3Mit106 か ら D3Mit260 ま で の asked で chromosomes み in え を raw じ た マ ウ ス を mating た を に い, N9 generation. D3Mit13 か ら D3Mit25 ま で の about 4 cm の field が ヘ テ ロ type N9 で は third mortar 歯 が し, EL ホ モ type N9 で は 歯 が owe such as し た と い う results, こ を に owe の field such as 歯 の reason but 伝 child が exist す る こ と を Ming ら か に し た.

项目成果

マウス欠如歯の原因遺伝子のマッピング

绘制导致小鼠牙齿缺失的基因图谱

• 发表时间: 2004
• 期刊: 小児歯科学雑誌 42(2)
• 作者: 清水武彦;韓娟;岡本春憲;新井陽子;前田隆秀
• 通讯作者: 前田隆秀

Localization of am3 using EL congenic mouse strains

使用 EL 同系小鼠品系定位 am3

• 发表时间: 2005
• 期刊: Journal of Dental Research 84(4)
• 作者: T.Shimizu;J.Han;Y.Asada;H.Okamoto;T Maeda
• 通讯作者: T Maeda