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感染防御抗原Ligタンパク質を介したレプトスピラの細胞接着機構の解明

感染性保护性抗原Lig蛋白介导的钩端螺旋体细胞粘附机制的阐明

基本信息

批准号：
16780215
负责人：
小泉信夫
金额：
$ 1.6万
依托单位：
National Institute of Infectious Diseases
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2006
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16780215/
关键词：
レプトスピラ細胞接着ファージディスプレイ Bacterial Two Hybrid法

项目摘要

レプトスピラは人獣共通感染症であるレプトスピラ症の起因菌であるが,その病原性機構はほとんど明らかになっていない.レプトスピラ症の多彩な臨床症状は,レプトスピラが多様な臓器に接着・侵入することで引き起こされる.研究代表者はこれまでの研究から,他の病原性細菌の細胞接着因子と相同性のある病原性レプトスピラのLigタンパク質を同定し,このタンパク質がレプトスピラの接着因子として機能しているかについて解析を行ってきた.しかしながら,培養細胞へのレプトスピラの接着において,Ligタンパク質が接着因子として機能しているとの決定的な証明を行うことはできなかった.そこで,レプトスピラの細胞接着因子を網羅的に解析するために,ファージディスプレイ法により,培養細胞への接着に必須のレプトスピラ遺伝子の同定を試みた.全ゲノム配列が明らかになっているレプトスピラFiocruz L1-130株よりゲノムを抽出・断片化を行い,1〜3kbの大きさの断片を回収し,T7ファージの10Bキャプシドタンパク質との融合タンパク質としてファージ上に提示するゲノムライブラリーを作製した.このライブラリーをFiocruz株の保菌動物であるラットの腎臓上皮由来培養細胞NRK-52Eへの結合を指標にスクリーニングを行い,結合するクローンを選抜し,インサートの塩基配列を決定した.独立した6回のスクリーニングを行い,結合ファージクローンのインサートの配列を決定したところ,同一の塩基配列をもつクローンが認められた.今後これらのクローンのレプトスピラ遺伝子について,組換えタンパク質の作製を行い,その組換えタンパク質がレプトスピラの培養細胞への接着を阻害できるかについて明らかにすることで,レプトスピラの接着因子の同定を行っていく.

The causative agent of the disease is the pathogenic agent. The clinical symptoms of the disease are colorful, and the symptoms of the disease are complicated. The representative of the research team has conducted research on the identification and characterization of cell adhesion factors of pathogenic bacteria, and the analysis of cell adhesion factors of pathogenic bacteria. Culture of cell culture and cell culture of cell culture, cell culture and cell culture. In this way, the analysis of cell adhesion factors in culture cells and the identification of cell adhesion factors in culture cells are necessary. The complete list of the Fiocruz L1-130 strain is divided into three parts: extraction and fragmentation, 1 ~ 3kb large fragments are retrieved,T7 and 10B are extracted and the quality of the fusion is displayed on the screen. Fiocruz strain of preserved animal, the kidney epithelial origin culture cells NRK-52E, the binding index, the binding index, the binding index. Independent of the six rounds of the game, combined with the game of the game to determine the allocation of the game, the same game of the game to determine the allocation of the game. In the future, the cell culture system will be modified to prevent cell culture from further damage.

项目成果

期刊论文数量（15）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

インドネシア・バリ島で感染したLeptospira botgpetersenii血清型Sejroeによるレプトスピラ症の1例

印度尼西亚巴厘岛一例Sejroe血清型博氏钩端螺旋体引起的钩端螺旋体病

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
感染症学雑誌 79(4)
影响因子：
0
作者：
K.Kimura;L.D.Spate;M.P.Green;R.M.Roberts;T.Yoshimura;Yamamura et al.;Nakao et al.;Yasuo et al.;Yasuo et al.;Yasuo et al.;Watanabe et al.;Yasuo et al.;Yasuo et al.;Yamamura et al.;Yasuo et al.;Tomomi Tanaka;Chiho Suganuma;田中知己;Tomomi Tanaka;Masuzawa T et al.;Iyoda S et al.;小泉信夫他;Nakamura M et al.;Koizumi N et al.;坂本光男他
通讯作者：
坂本光男他

New genomospecies related to Borrelia valaisiana, isolated from mammals in Okinawa archipelago, Japan

DOI：
10.1099/jmm.0.05337-0
发表时间：
2004-05-01
期刊：
JOURNAL OF MEDICAL MICROBIOLOGY
影响因子：
3
作者：
Masuzawa, T;Hashimoto, N;Imai, Y
通讯作者：
Imai, Y

Sporadic cases and an outbreak of leptospirosis probably associated with recreational activities in rivers in the northern part of Okinawa Main Island

DOI：
10.1292/jvms.68.83
发表时间：
2006-01-01
期刊：
JOURNAL OF VETERINARY MEDICAL SCIENCE
影响因子：
1.2
作者：
Nakamura, M;Taira, K;Koizumi, N
通讯作者：
Koizumi, N

レプトスピラ

钩端螺旋体

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
日本臨床増刊号広範囲血液・尿化学検査免疫学的検査増刊
影响因子：
0
作者：
K.Kimura;L.D.Spate;M.P.Green;R.M.Roberts;T.Yoshimura;Yamamura et al.;Nakao et al.;Yasuo et al.;Yasuo et al.;Yasuo et al.;Watanabe et al.;Yasuo et al.;Yasuo et al.;Yamamura et al.;Yasuo et al.;Tomomi Tanaka;Chiho Suganuma;田中知己;Tomomi Tanaka;Masuzawa T et al.;Iyoda S et al.;小泉信夫他;Nakamura M et al.;Koizumi N et al.;坂本光男他;小泉信夫他;小泉信夫他
通讯作者：
小泉信夫他

ワイル病秋やみ混合ワクチン.ワクチンの事典

威尔氏病秋见联合疫苗.疫苗百科全书

DOI：
发表时间：
2004
期刊：
影响因子：
0
作者：
K.Kimura;L.D.Spate;M.P.Green;R.M.Roberts;T.Yoshimura;Yamamura et al.;Nakao et al.;Yasuo et al.;Yasuo et al.;Yasuo et al.;Watanabe et al.;Yasuo et al.;Yasuo et al.;Yamamura et al.;Yasuo et al.;Tomomi Tanaka;Chiho Suganuma;田中知己;Tomomi Tanaka;Masuzawa T et al.;Iyoda S et al.;小泉信夫他;Nakamura M et al.;Koizumi N et al.;坂本光男他;小泉信夫他;小泉信夫他;Masuzawa T et al.;中村正治他;増沢俊幸他;小泉信夫他;小泉信夫他
通讯作者：
小泉信夫他