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宿主持続感染を可能にするレプトスピラ遺伝子ネットワークの解明

阐明导致宿主持续感染的钩端螺旋体基因网络

基本信息

批准号：
22K07062
负责人：
小泉信夫
金额：
$ 2.66万
依托单位：
National Institute of Infectious Diseases
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

人獣共通感染症であるレプトスピラ症の病原体レプトスピラは，ラットなどの宿主動物の腎臓に持続感染しているが，持続感染の成立に必須のレプトスピラ因子はほとんど明らかになっていない．本研究では，遺伝子発現調節や生理的プロセス制御に関わるシグマ因子遺伝子およびホスファターゼ遺伝子のトランスポゾン挿入変異体において，感染時に発現変動がみられる遺伝子・リン酸化の変動がみられるタンパク質をコードする遺伝子のノックアウト株を作製して感染性を明らかにし，各種のin vitro実験を行いそれら遺伝子産物の機能を明らかにすることで，宿主持続感染に必須のレプトスピラ遺伝子ネットワークを読み解くことを目的とする．各変異体を同数のコントロール株とともにラットWKAH/Hkmメス6週齢に腹腔内接種し，３日後に採血し血液を希釈してEMJHプレート培養を行ったところ，両変異体とも純培養ではなくコンタミネーションしていうことが明らかとなった．そのため，変異体のストックをプレート培養および限界希釈法によって目的とする変異体のクローニングを行い，限界希釈法によって両変異体の純培養を得ることができた．これら変異体のトランスポゾン挿入位置をターゲットとして，変異体およびコントロール株のリアルタイムPCRによるゲノム定量試験系を確立した．またin vitroでの増殖速度を調査した結果，変異株の増殖速度はコントロール株と変わらないことが明らかとなった．

The common infectious disease in humans is the pathogen of the disease, and the host animal is the kidney of the disease. The establishment of infection is necessary, and the establishment of infection must be carried out. In this study, we found out that the factors that regulate the physiological regulation of the human body are controlled by the genetic factors. Infection时に発appears to change the movement of the materialードする伝子のノックアウト strains をして infectious を明らかにし, various のin The function of the in vitro実験を行いそれら缝子product is clear, the host maintains続Infection is necessary for the infection. Each allogeneic strain of the same number of allogeneic strains, WKAH/Hkm, was injected intraperitoneally at 6 weeks, and blood was collected 3 days later.てEMJH プレート culture を行ったところ, 両変 allogeneic とも pure cultureではなくコンタミネーションしていうことが明らかとなった．そのため, 変different body のストックをプレート culture およびlimited 瀈法によってpurpose とする剉different The body is pure and pure, and the limit is the limit.これら変variant のトランスポゾン insert position をターゲットとして, 変variant およびThe PCR quantitative test system of Konotron Co., Ltd. has been established. The results of the investigation of the growth rate of the different strains in vitro, the growth rate of different strains, the growth rate of different strains, the growth rate of different strains, the growth rate of different strains, and the growth rate of different strains.