宿主持続感染を可能にするレプトスピラ遺伝子ネットワークの解明

阐明导致宿主持续感染的钩端螺旋体基因网络

• 批准号: 22K07062
• 负责人: 小泉 信夫
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: National Institute of Infectious Diseases
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07062/
• 关键词: レプトスピラ; レプトスピラ症; 人獣共通感染症; 持続感染; 遺伝子発現

人獣共通感染症であるレプトスピラ症の病原体レプトスピラは，ラットなどの宿主動物の腎臓に持続感染しているが，持続感染の成立に必須のレプトスピラ因子はほとんど明らかになっていない．本研究では，遺伝子発現調節や生理的プロセス制御に関わるシグマ因子遺伝子およびホスファターゼ遺伝子のトランスポゾン挿入変異体において，感染時に発現変動がみられる遺伝子・リン酸化の変動がみられるタンパク質をコードする遺伝子のノックアウト株を作製して感染性を明らかにし，各種のin vitro実験を行いそれら遺伝子産物の機能を明らかにすることで，宿主持続感染に必須のレプトスピラ遺伝子ネットワークを読み解くことを目的とする．各変異体を同数のコントロール株とともにラットWKAH/Hkmメス6週齢に腹腔内接種し，３日後に採血し血液を希釈してEMJHプレート培養を行ったところ，両変異体とも純培養ではなくコンタミネーションしていうことが明らかとなった．そのため，変異体のストックをプレート培養および限界希釈法によって目的とする変異体のクローニングを行い，限界希釈法によって両変異体の純培養を得ることができた．これら変異体のトランスポゾン挿入位置をターゲットとして，変異体およびコントロール株のリアルタイムPCRによるゲノム定量試験系を確立した．またin vitroでの増殖速度を調査した結果，変異株の増殖速度はコントロール株と変わらないことが明らかとなった．

钩端螺旋体是人畜共患病的一种病原体，在宿主动物（例如大鼠）中持续感染了肾脏，但是几乎尚不清楚为建立持续感染而至关重要的钩端螺旋体因子。在这项研究中，我们旨在了解编码蛋白质的基因的感染性，这些蛋白质在基因表达和磷酸化中显示出变化的sigma因子基因基因和磷酸酶基因的转座子插入突变体中涉及基因表达调控和生理过程调节的磷酸酶基因的传染性，并通过对这些基因的启发来阐明基因的范围，以阐明这些基因的范围，我们的基因范围，我们的基因范围，我们的效果，我们的函数，我们的函数，我们的函数，我们的范围是我们的范围。 感染。将每个突变体在6周龄时以相同数量的对照菌株接种腹膜内，并在收集3天的血液后，将血液稀释并培养EMJH板。据表明，两个突变体均被污染而不是纯文化。因此，通过板培养和极限稀释法克隆了靶突变量，并且可以通过极限稀释法获得两个突变体的纯培养物。我们使用转座子插入位置作为目标建立了使用突变体和对照菌株实时PCR的基因组定量测试系统。此外，研究了体外的生长速率，并发现突变菌株的生长速率与对照菌株的生长速率没有什么不同。

项目成果

光活性型アデニル酸シクラーゼによるレプトスピラ・コバヤシイの運動活性化

光激活腺苷酸环化酶激活小林钩端螺旋体的运动

• 发表时间: 2022
• 作者: 若林丈人;佐藤勉;今村大輔;阿部圭吾，小泉信夫，中村修一;許 駿，小泉信夫，森本雄祐，尾鶴亮，増澤俊幸，中村修一
• 通讯作者: 許 駿，小泉信夫，森本雄祐，尾鶴亮，増澤俊幸，中村修一

背景分離法を利用した培養腎臓細胞上でのレプトスピラの運動解析

应用背景分离法分析钩端螺旋体在培养肾细胞上的运动

• 发表时间: 2022
• 作者: 吉岡 俊彦;合田 光寛;神田 将哉;吉田 愛美;糸林 小友理;杉本 祐悟;石澤 有紀;八木 健太;相澤 風花;濱野 裕章;岡田 直人;座間味 義人;石澤 啓介;伊藤美菜子;阿部圭吾，小泉信夫，中村修一
• 通讯作者: 阿部圭吾，小泉信夫，中村修一