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食細胞活性化時の情報伝達・細胞応答の機構に関するRNA干渉法を用いた解析

RNA干扰法分析吞噬细胞激活过程中的信息传递和细胞反应机制

基本信息

批准号：
16790075
负责人：
安達玲子
金额：
$ 2.18万
依托单位：
National Institute of Health Sciences
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は、食細胞活性化時の情報伝達及び細胞応答の機構について、RNA干渉法を用いて解析することを目的とする。情報伝達因子の一つであるSrcファミリーチロシンキナーゼ(SFK)に着目し、平成16年度には、Hck, Lyn, Fgrの3種のSFKの発現量が食細胞の分化過程で増大すること、及びこれらのSFKに対するsiRNAを用いて、細胞刺激から活性酸素産生に至る情報伝達経路において、3種のSFKの中でLynが最も重要であることを示した。17年度は貪食反応について検討し、やはりLynが最も大きな役割を果たしていることを示した。18年度においては、情報伝達経路においてSFKの下流に位置するアダプタータンパク質c-Cblに着目し、c-Cblのリン酸化とSFKとの関連について検討した。細胞は、ヒト単球系培養細胞U937をTNFαと活性型ビタミンD_3によりマクロファージ様に分化誘導して用いた。siRNAはエレクトロポーレーションにより細胞に導入し、各標的SFKの発現量低下をウェスタンブロッティングにて確認した。細胞刺激は、補体成分をコーティングした多糖粒子オプソニン化ザイモザン(OZ)を用いて行った。c-Cblのリン酸化は、c-Cblのリン酸化チロシンに対する特異的な抗体を用いて、ウェスタンブロッティングにより検出した。マクロファージ様U937細胞をOZで刺激したところ、c-Cblのリン酸化チロシンレベルの一過性の上昇が見られた。3種のSFKに対するsiRNAそれぞれを導入した細胞で検討したところ、Lynの発現量を低下させた細胞において、c-Cblのチロシンリン酸化が最も強く阻害された。この結果から、細胞刺激時、情報伝達経路の一因子であるc-Cblのリン酸化レベルの調整にLynが重要な役割を果たしていることが明らかとなった。

In this study, the emotion was reached during the activation of food cells, and the response mechanism was used to analyze the purpose of cell activation by RNA method. The achievement factor of the year is: Src, Lyn, Hck, Lyn The process of cell differentiation of Fgr and SFK is the process of cell differentiation, and the process of cell differentiation is that Lyn is the most important enzyme in 3-SFK, and that Lyn is the most important one in the process of differentiation. In the year 17, the most important food in the world is to be cut and cut in the first place in the year 17. The most important thing is to cut the fruit in the first place in the year 17. This is the most important thing in the year. The most important thing is to cut the fruits of the Lyn. In the course of the year 18, there is a lot of information about the road, the SFK, the location, the location, the c-Cbl, the eyes, the c-Cbl, the acidification, the SFK, the dirt. Cell culture, cell culture The siRNA

项目成果

期刊论文数量（4）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Cofilin plays a critical role in IL-8-dependent chemotaxis of neutrophilic HL-60 cells through changes in phosphorylation

DOI：
10.1189/jlb.0506314
发表时间：
2007-03-01
期刊：
JOURNAL OF LEUKOCYTE BIOLOGY
影响因子：
5.5
作者：
Hirayama, Akiko;Adachi, Reiko;Suzuki, Kazuhiro
通讯作者：
Suzuki, Kazuhiro

Ribosomal protein S18 identified as a cofilin-binding protein by using phage display library.

通过噬菌体展示文库鉴定核糖体蛋白 S18 为肌丝蛋白丝切蛋白结合蛋白。

DOI：
发表时间：
2004
期刊：
Bio Mol.Cell.Biochem 262
影响因子：
0
作者：
Kusui K.;Sasaki H.;Adachi R.;Matsui S.;Yamamoto K.;Yamaguchi T.;Kasahara T.;Suzuki K.
通讯作者：
Suzuki K.

Lyn, one of the Src-family tyrosine kinases expressed in phagocytes, plays an important role in β2 integrin-signalling pathways in opsonized zymosan-activated macrophage-like U937 cells