膵臓外分泌細胞に存在するKチャネル蛋白の構造機能協関

外分泌胰腺细胞中 K 通道蛋白的结构-功能关系

• 批准号: 16790140
• 负责人: 林 美樹夫
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: Kansai Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16790140/
• 关键词: イオン輸送; 重炭酸イオン; 内向き整流性Kチャネル; 膵臓導管細胞; パッチクランプ法

膵臓導管細胞に機能発現する内向き整流性Kチャネル(Kir)の分子基盤を明らかにするため、ラット膵臓導管細胞新鮮分離標本にセルアタッチパッチクランプ法を適用し単一チャネル電流の性質を調べた。非刺激状態において単一チャネルコンダクタンスが40pS、55pS、108pSおよび180pS(Maxi-K)の4種類のチャネル電流を認め、その出現頻度はそれぞれ40%、20%、40%および30%であった。このうち40pSのチャネルは内向き整流性Kチャネル(Kir2.1)の開閉パターンと類似した。55pSおよび108pSのチャネルはCa依存性Kチャネル(SK4/IK1)と類似した。Maxi-Kチャネルは細胞外液にセクレチンを加えると、チャネル開確率が増加した。ラット膵臓mRNAを用いたRTPCR法により、Kir2.1、Kir2.2、Kir2.4およびKir4.2の発現を認めたが、Kir1.1とKir2.3の発現は認められなかった。これらのKirの分子クローニングを試みたところ、それらの一次構造は報告されているものとほぼ一致した。免疫組織化学法により導管細胞の管腔側および基底外側細胞膜にKir2.1の発現を認めた。以上の結果から、膵臓導管細胞ではKjr分子がホモまたはヘテロで機能的チャネルを構成し、静止膜電位の維持に役割を果たす可能性が示唆された。また、SK4/IK1様チャネルおよびMaxi-Kチャネルは唾液腺腺房細胞に機能発現するものと類似していた。これらのチャネルは分泌刺激により活性化することで、膵液分泌の駆動力維持に貢献している可能性がある。

Cui viscera function of duct cells に 発 now す る introverted き rectifier sex K チ ャ ネ ル molecular base plate (Kir) の を Ming ら か に す る た め, ラ ッ ト Cui viscera catheter fresh isolated specimens に セ ル ア タ ッ チ パ ッ チ ク ラ ン プ を applicable し 単 a チ ャ ネ ル nature of current の を adjustable べ た. A non stimulated に お い て 単 チ ャ ネ ル コ ン ダ ク タ ン ス が 40 ps, 55 ps and 108 ps お よ び 180 ps (Maxi - K) の 4 kinds の チ ャ ネ ル current を recognize め, そ frequency の は そ れ ぞ れ 40%, 20%, 40% お よ び 30% で あ っ た. Youdaoplaceholder6 うち うち40pS <s:1> チャネ チャネ チャネ <s:1> <s:1> inward <s:1> rectification Kチャネ <e:1> (Kir2.1) <s:1> on/off パタ <s:1> た と と similar to <s:1> た. 55pSおよび108pS チャネ チャネ チャネ チャネ チャネ Ca dependency Kチャネ (SK4/IK1)と similar to <s:1> た. Maxi-Kチャネ にセ extracellular fluid にセ <s:1> レチ レチ を を plus えると, チャネ が opening accuracy が plus た た. Crucial ラ ッ ト Cui mRNA を with い た RTPCR method に よ り, Kir2.1, Kir2.2, Kir2.4 お よ び Kir4.2 の 発 を now recognize め た が, Kir1.1 と Kir2.3 の 発 は now recognize め ら れ な か っ た. こ れ ら の Kir の molecular ク ロ ー ニ ン グ を try み た と こ ろ, そ れ ら の a tectonic は report さ れ て い る も の と ほ ぼ consistent し た. Immunohistochemical method: によ によ catheter cells, lumen side of the tube および, basolateral cell membrane にKir2.1, を recognition めた. の above results か ら, Cui perforatien duct cells で は Kjr molecular が ホ モ ま た は ヘ テ ロ で functionary チ ャ ネ ル を constitute し, resting membrane potential の maintain に "を cut fruit た が す possibility in stopping さ れ た. ま た, SK4 / IK1 others チ ャ ネ ル お よ び Maxi - K チ ャ ネ ル は salivary gland room cell に 発 now す る も の と similar し て い た. こ れ ら の チ ャ ネ ル は secretion stimulation に よ り activeness す る こ と で, Cui liquid secretion の 駆 power maintain に contribution し て い る possibility が あ る.