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活性化肝星細胞におけるinterferon-α,γ標的タンパク質の網羅的解析

活化肝星状细胞中干扰素α、γ靶蛋白的综合分析

基本信息

批准号：
16790211
负责人：
及川浩樹
金额：
$ 1.73万
依托单位：
Iwate Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16790211/
关键词：
肝星細胞線維化 Vitamin A INFγ 細胞骨格細胞増殖プロテオー慢性肝疾患

项目摘要

(目的)肝の線維化は,肝炎・肝硬変などの慢性炎症性肝疾患で最も普遍的にみられる形態変化で,肝星細胞(hepatic stellate cell : HSC)がその主要な役割を担っていると推定されている.当該研究課題では,INF-α/-γの有するHSC形質復元作用に関わる分子機構を明らかにすることを目的として,(1)二次元電気泳動,(2)抗リン酸化アミノ酸特異抗体によるブロッティング,(3)質量分析計を用いたフィンガープリント解析による蛋白質の同定,等の手技を駆使して,INF-α/-γ刺激によって変化する蛋白質およびそのリン酸化状態の変化を網羅的に解析する.(方法)INF-α,-γ投与効果のプロテオーム解析.(1)無処置のWistar系ラット(250g前後)の肝組織より比重遠心法を用いてHSCを分離する.(2)INF-α/-γの添加.(3)二次元電気泳動(4)質量分析.(結果)1)活性化星においてINFγ投与によって変動した蛋白質のスポットはのべ217spotを検出した.2)検出されたSpotは従来言われていた抗線維化マーカー,細胞骨格,細胞増殖関連分子に加えて,Vitamin Aのエステルに関わる長鎖脂肪酸の合成系の亢進が認められた・(方向性)INFγは肝星細胞に対して,本来の機能の一つであるVitamin Aの取り込みを活性化させる可能性が示唆された.本研究ではさらに,長鎖脂肪酸合成系酵素の転写活性,およびretinoid輸送系の関連蛋白質の変動を明らかにしたい.

(objective) liver cirrhosis is the most common form of chronic inflammatory liver disease. Liver stellate cells (hepatic stellate cell: HSC) are the most common forms of liver disease. When it is time to study the project, INF- α /-γ has a molecular mechanism for the determination of HSC proteins, (1) two-dimensional electrophoretic exercise, (2) anti-sulfonic acid specific antibodies, (3) quantitative analysis programs, quantitative analysis programs are used to analyze the protein levels in the same way, and other technical tools are used to make them stable. INF- α /-γ stimulates the protein profile to acidify the profile of the web. (methods) INF- α,-γ was injected and analyzed. (1) the specific gravity of liver tissue was analyzed by the method of INF- α,-γ injection (before and after 250g). (2) INF- α /-γ was added. (3) two-dimensional electrophoresis (4) quantitative analysis. (results) 1) Activation of INF gamma radiation and activation of INF gamma radiation. (results) 1) activating INF gamma radiation and activating DNA gamma radiation. (results) (results) 1) activating INF gamma radiation and activating DNA gamma rays. (results) 1) activating stars and proteins. (results) (results) 1) activating and activating star DNA gamma rays and activating proteins. Vitamin An is sensitive to the synthesis of long-term fatty acids. (directional) INF γ liver star cells are sensitive, and the mechanism is supposed to be able to detect the possibility of Vitamin An activation. In this study, the enzyme activity of long-term fatty acid synthesis system was studied, and the protein enzyme activity of retinoid was detected.