病原性真菌カンジダ酵母の糖鎖合成に関わる遺伝子群の病原性への関与についての研究

糖链合成相关基因在致病真菌念珠菌发病机制中的研究

• 批准号: 16790263
• 负责人: 中山 浩伸
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: Suzuka National College of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16790263/
• 关键词: 病原性真菌; Candida glabrata; GDP-マンノース合成; PSA1; SRB1; VIG9; paralogue; 環境応答; DPM1; ALG1; PMI40; in vivo-in vitro gap; 機能相補; グルコースリプッレション

糖鎖合成の原料となるGDP-マンノースの合成に関わる遺伝子について,Candida glabrataおよびC.albicansを用いて以下の3点を明らかにした.1.C.glabrataにおいて,GDP-マンノース合成経路の位置する酵素(PMM1:mannose phosphomutase, ALG1:mannosyl transferase, DPM1:,Dolicol-phosphate mannose synthase, YRG4:GDP-mannose transporter)のプロモーターをテトラサイクリン応答性プロモーターに置換した変異株を作製した.テトラサイクリンの誘導体であるドキシサイクリンを加え,PMM1,ALGG1,DPM1およびVRG4遺伝子の発現を抑制したところ,グルコース,マンノース,グリセロール,それぞれを炭素源にしたいずれの培地でも菌の増殖は見られず,試験管内では生育に必須であることが分かった.今後,マウス体内での増殖の必須性について検討する.2.昨年度までの結果から,C.glabrataにおいてはGDP-mannose pyrophosphorylaseは2つ存在し(PSA1,PSA2),PSA1は,グルコースが炭素源のときのみ,生育に対して必須で,また,PSA2の発現はグルコースによって抑制を受けることが明らかとなった。今年度は,さらに培養条件を変えて,これら2遺伝子の発現量を調べたところ,嫌気条件下の培養ではPSA1の発現は増強され,PSA2の発現は抑制されていた.このことからも,PSA1とPSA2の発現は相補的であることが示唆された.また,嫌気条件下のpsa1欠損株が宿主体内と異なり,生育できなかったことから,宿主体内の培養を考える上では,嫌気条件だけでは不十分なことが示唆された。そのため,抗真菌剤のスクリーニングに使用する培地は検討が必要であろうと考えられた.3.C.glabrataと同様GDP-mannose pyrophosphorylaseを2遺伝子(CaPSA1,CaPSA2)もつC.albicansについて,炭素源を変化させ,これら2遺伝子の発現量を調べたところ,CaPSA1はグリセロール培地ではほとんど発現せず,グルコース培地での発現が一番高かった.また,CaPSA2はグルコース培地での発現が一番低かった.このように,C.glabrataと同様なこれら2遺伝子の発現は相補的になされていることが分かった.今後変異体を用いて,CaPSA1,CaPSA2の特徴づけを行う予定である.

Sugar lock synthesis <s:1> raw material となるGDP- ノ ノ ス ス ス ス に synthesis に related わる product 伝 に に て て て て て Candida Glabrata お よ び c.a. lbicans を with い て の 3 points below を Ming ら か に し た. 1. The C.g labrata に お い て, GDP - マ ン ノ ー ス synthetic の 経 road location す る enzyme (PMM1: mannose phosphomutase, ALG1:mannosyl transferase, DPM1:,Dolicol-phosphate mannose synthase, YRG4:GDP-mannose From) の プ ロ モ ー タ ー を テ ト ラ サ イ ク リ ン 応 a sexual プ ロ モ ー タ ー に replacement し た - different strains を cropping し た. テ ト ラ サ イ ク リ ン の inductor で あ る ド キ シ サ イ ク リ ン を え, PMM1, ALGG1, DPM1 お よ び VRG4 heritage 伝 son の 発 now を inhibit し た と こ ろ, グ ル コ ー ス , マ ン ノ ー ス, グ リ セ ロ ー ル, そ れ ぞ れ を carbon source に し た い ず れ の petty で の raised も bacteria colonization は see ら れ ず, test tube で は fertility に must で あ る こ と が points か っ た. In the future, マ ウ ス body で の raised colonization の necessity に つ い て beg す 検 る. 2. Yesterday the annual ま で の results か ら, C.g labrata に お い て は GDP - mannose Pyrophosphorylase は 2 つ exist し (PSA1, PSA2), PSA1 は, グ ル コ ー ス が carbon source の と き の み, fertility に し seaborne て must で ま た, PSA2 の 発 now は グ ル コ ー ス に よ っ て inhibit を by け る こ と が Ming ら か と な っ た. Our は, さ ら に culture conditions を - え て, こ れ ら 2 heritage 伝 son の を 発 now quantity adjustable べ た と こ ろ, under the condition of suspicion 気 の cultivate で は PSA1 の 発 は now raised strong さ れ, PSA2 の 発 now は inhibit さ れ て い た. こ の こ と か ら も, PSA1 と PSA2 の 発 は now phase of で あ る こ と が in stopping さ れ た. ま た, disrelish の 気 conditions Psa1 owe が damage strain in the host と different な り, fertility で き な か っ た こ と か ら, the host の cultivate を え test on る で は, disrelish 気 conditions だ け で は not quite な こ と が in stopping さ れ た. そ の た め, antifungal の ス ク リ ー ニ ン グ に use す る petty は beg が 検 necessary で あ ろ う と exam え ら れ た. 3. The C.g labrata と with others in GDP - mannose Pyrophosphorylase を 2 heritage 伝 child (CaPSA1 CaPSA2) も つ c.a. lbicans に つ い て, carbon source を variations change さ せ, こ れ ら 2 heritage 伝 son の を 発 now quantity adjustable べ た と こ ろ, CaPSA1 は グ リ セ ロ ー ル petty で は ほ と ん ど 発 now せ ず, グ ル コ ー ス petty で の 発 が now A high か っ た. ま た, CaPSA2 は グ ル コ ー ス petty で の 発 が now a low か っ た. こ の よ う に, C.g labrata と with others な こ れ ら 2 heritage 伝 son の 発 は now phase of に な さ れ て い る こ と が points か っ た. In the future, the を of the variant will be determined by を て,CaPSA1,CaPSA2 <s:1> characteristics づけを line う である.