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インドネシア・スラバヤ地方における新規下痢原因菌の発見と疫学的解析

印度尼西亚泗水一新型腹泻细菌的发现及流行病学分析

基本信息

批准号：
16790262
负责人：
越智定幸
金额：
$ 2.37万
依托单位：
Fujita Health University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16790262/
关键词：
毒素原性大腸菌易熱性エンテロトキシン下痢

项目摘要

1.スラバヤ地方における臨床、及び、環境分離株のPCRスクリーニングを行った。PCRによる毒素原性大腸菌(ETEC)以外の菌株の陽性反応のシグナルは弱く、シグナル強度は、再デザインされたプライマーを用いても改善されなかった。2.PCR スクリーニングで陽性を示した菌株については、グラム陰性の桿菌でチトクローム・オキシダーゼ試験陽性であった。本菌株は、栄養最小限培地やLuria-Bertani brothでは、ETECなどの大腸菌と比較して著しく増殖が遅かった。そこで、他の種々の複合培地で培養を行ったところ、栄養豊富な複合培地では増殖速度の上昇が認められるが、これら条件で培養した菌株では、PCR反応による毒素遺伝子シグナルが陰性化する傾向にあることが判明した。3.スラバヤ地方から分離されたETEC以外のPCR陽性株について菌体DNAを種々の制限酵素で消化し、パルスフィールド電気泳動を行った後、ゲル中のDNA断片をニトロセルロース膜に転写し、ETECの易熱性エンテロトキシン遺伝子に対するプローブに対してハイブリダイゼーションするバンドの検出を試みた。その結果、low stringency条件下で本プローブに反応するバンドが検出されることが判明したので、このハイブリダイゼーションシグナルを示すバンドをアガロースゲルから切り出し、クローニングべクターにライゲーション後、大腸菌コンピテントセルにトランスフォーメーションした。平板培地上に形成されるコロニーをピックアップし、PCR反応により易熱性エンテロトキシン類似遺伝子を含むクローンをスクリーニングした。PCR陽性反応を示すクローンをピックアップし、このクローン中のプラスミドの精製が完了した。

1. PCR detection of clinical, environmental and local isolates The positive reaction of strains other than E. coli (ETEC) by PCR was weak, weak, and weak. 2. PCR detection of positive strains, detection of negative strains, detection of positive strains This strain has a minimum culture limit of Luria-Bertani broth, ETEC and Escherichia coli. The growth rate of these strains was increased by PCR reaction and the negative tendency of these strains was identified. 3. PCR-positive strains other than ETEC were isolated and digested by restriction enzymes, and DNA fragments were isolated from ETEC after electromigration. All results, low mobility conditions, this is the case, the case is the case, the case is the case. On the plate, the formation of the gene was studied. The PCR reaction was carried out in the presence of a similar gene. PCR positive reaction was detected by PCR, and the purification of PCR positive reaction was completed.

项目成果

期刊论文数量（7）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Induction of thymus-derived γδT cells by Escherichia coli enterotoxin B subunit in peritoneal cavities of mice

大肠杆菌肠毒素B亚基诱导小鼠腹腔胸腺来源的γδT细胞

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
Clin.Diagn.Lab.Immunol. 12・1
影响因子：
0
作者：
Le QM et al.;Suzuki T et al.;Hatakeyama S et al.;Fujii K et al.;Goto H;Fujii K et al.;Maeda Y et al.;Hatta M et al.;Hiroki Takahashi et al.;Roger H.Adamson et al.;Toshiyasu Shimizu et al.
通讯作者：
Toshiyasu Shimizu et al.

Clostridium perfringens epsilon-toxin increases permeability of single perfused microvessels of rat mesentery

DOI：
10.1128/iai.73.8.4879-4887.2005
发表时间：
2005-08-01
期刊：
INFECTION AND IMMUNITY
影响因子：
3.1
作者：
Adamson, RH;Ly, JC;Curry, FE
通讯作者：
Curry, FE

Induction of thymus-derived gd T cells by Escherichia coli enterotoxin B subunit n peritoneal cavities of mice

小鼠腹腔内大肠杆菌肠毒素 B 亚基诱导胸腺来源的 gd T 细胞

DOI：
发表时间：
2005
期刊：
Clin.Diagn.Lab.Immunol. 12・1
影响因子：
0
作者：
Le QM et al.;Suzuki T et al.;Hatakeyama S et al.;Fujii K et al.;Goto H;Fujii K et al.;Maeda Y et al.;Hatta M et al.;Hiroki Takahashi et al.;Roger H.Adamson et al.;Toshiyasu Shimizu et al.;Toshiyasu Shimizu et al.;Toshiyasu Shimizu et al.
通讯作者：
Toshiyasu Shimizu et al.

Clostridium perfringens α-toxin activates the sphingomyelin metabolism system in sheep erythrocytes

DOI：
10.1074/jbc.m307046200
发表时间：
2004-03-26
期刊：
JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
影响因子：
4.8
作者：
Ochi, S;Oda, M;Sakurai, J
通讯作者：
Sakurai, J

Mutant Escherichia coli enterotoxin as a mucosal adjuvant causes specific CD_4^+ and CD_8^+T cells to produce IFNγ and TNFα in response to nasal killed-Bacillus Catmette-Guerin vaccine in mice

突变型大肠杆菌肠毒素作为粘膜佐剂，引起小鼠鼻腔灭活芽孢杆菌疫苗的特异性 CD_4^+ 和 CD_8^+T 细胞产生 IFNγ 和 TNFα

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
Vaccine (in press)
影响因子：
0
作者：
Le QM et al.;Suzuki T et al.;Hatakeyama S et al.;Fujii K et al.;Goto H;Fujii K et al.;Maeda Y et al.;Hatta M et al.;Hiroki Takahashi et al.
通讯作者：
Hiroki Takahashi et al.