同種皮膚移植片拒絶反応のメカニズムの解明

阐明同种异体皮肤移植排斥的机制

基本信息

  • 批准号:
    16790626
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.24万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
  • 财政年份:
    2004
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2004 至 2006
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

平成16年度は育児休業などの取得に伴い交付申請を保留し、17年度より研究を開始した。平成17年度は、1.SCIDマウスにB6クラスIIノックアウトマウスの体幹皮膚を移植した後にBALB/c CD4細胞を腹腔内に移入することにより、CD4T細胞が、直接同種皮膚移植片を認識できない、いわゆる間接認識機構(indirect pathway)による同種皮膚移植片拒絶反応モデル作成した。2.拒絶片局所にCD4細胞の他に、NK細胞、マクロファージが浸潤していることを免疫組織、フローサイトメトリーで確認した。3.さらに本モデルにアシアロGM1の腹腔内投与を行い、明らかな移植片の生着期間の延長をみたことより、NK細胞が本モデルにおける皮膚移植片拒絶反応に関与していると考えた。平成18年度は、このNK細胞のエフェクターメカニズムの解析を行った。1.NK細胞上のエフェクター分子の抗体投与によるブロッキングによる移植片生着期間延長効果の検討本モデルにおいて、皮膚移植1週間から2週間後に、移植片が完全に正嫡していることを確認してから、1x10^7/匹のCD4T細胞を移入。2日後より、抗NKG2Dモノクロナル抗体を週2回、腹腔内投与した。その結果、コントロールに比べ有意に移植片生着期間の延長をみた。2.移植片のNK細胞レセプター発現の確認次に、実際の移植片上にNK細胞レセプターが発現されているのかをPCR法を用いて調べた。その結果、拒絶反応が起こっている時期に一致して、アロの移植片上にのみRae-1の発現を認めた。シンジェニックの移植片には発現は認められなかった。3.TUNEL法によるアポトーシス検出本モデルにおける移植片拒絶反応はネクローシスによるものではなく、アポトーシスによるものであることが、TUNEL法を用いた組織染色で判った。4.NK細胞による拒絶反応が非特異的ではなく特異的に生じていることの確認アロのCD4細胞移入後に移植片上にRae-1が発現されるようになることで、NK細胞が同種移植片にアポトーシスを生じるものと推測したが、なぜ移植片にのみRae-1が発現されるのかは解明できなかった。
In 2016, the Ministry of Education issued an application for registration of children's education, and in 2017, the Ministry of Education began to conduct research. In 2017, the BALB/c CD4 cells were transplanted into the abdominal cavity after transplantation of stem skin, CD4 T cells, direct skin graft recognition, indirect pathway recognition, and rejection of skin graft. 2. Denial of CD4 cells, NK cells, immune tissue, immune tissue, immune tissue 3. Study on the effect of NK cells on the rejection of GM1 by intraperitoneal injection and the prolongation of the survival period of skin grafts. Heisei 18 years ago, the NK cells of the 1. Antibodies to NK cells were administered at different times, and the graft growth period was prolonged. The results showed that the graft was completely normal within 1 week and 2 weeks after skin transplantation. 1 x 10^7/mouse CD4 T cells were transplanted. Two days later, anti-NKG 2D antibody was administered intraperitoneally twice a week. The result is that the graft growth period is prolonged. 2. In order to confirm the development of NK cells in allografts, PCR method was used to adjust the development of NK cells in allografts. The results, rejection, and the development of Rae-1 on allografts were consistent. The graft was found to be unrecognizable. 3. TUNEL method is used to detect the presence and absence of tissue. 4. NK cells refused to respond to non-specific, non-specific.

项目成果

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