中枢神経系悪性腫瘍に対する放射線治療の基礎的研究

中枢神经系统恶性肿瘤放射治疗的基础研究

• 批准号: 16790718
• 负责人: 幡多 政治
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16790718/
• 关键词: 悪性神経膠腫; メラトニン; 抗腫瘍作用; 細胞保護作用

メラトニンには、腫瘍細胞のアポトーシスを誘起し、腫瘍の増殖を抑制する抗腫瘍作用や、フリーラジカルから細胞を保護するラジカルスカベンジャーとしての細胞保護作用があることが報告されている。そこで、中枢神経系悪性腫瘍において、メラトニンによる抗腫瘍効果や放射線照射における感受性の変化について検討した。96穴マイクロタイタープレートを用いて、100μlの培地(イーグルの最小必須培地+10%ウシ胎児血清+ペニシリン100U/ml+ストレプトマイシン100μg/ml)にヒト悪性神経膠腫細胞株U-87MGとBeckerを5×10^3個播種した。その後、CO_2インキュベーターで37℃、5%CO_2の条件下に静置培養し、細胞増殖試験を行った。細胞を播種してから6時間前培養を行い、6,24,48時間後にWST-8溶液10μlを添加して1.5時間呈色反応を行い、生成したホルマザンの吸光度(450nm)をマイクロプレートリーダーで測定し細胞数を算出した。U-87MGは、6,24,48時間後にそれぞれ平均1.3±0.1倍,2.0±0.2倍,4.5±0.2倍に、Beckerは、1.4±0.1倍,2.1±0.2倍,3.0±0.1倍に増殖していた。次に、100μlの培地にU-87MGとBeckerを5×10^3個播種し、同一条件下で24時間前培養を行った。その後、0,1×10^<-7>,10^<-9>,10^<-11>,10^<-13>Mの濃度になるようにメラトニンを添加し、48時間後に同様の方法で細胞数を計測した。U-87MG、Beckerともに、0Mに比べて1×10^<-7>,10^<-9>,10^<-11>Mのメラトニンを含む培地において細胞の増殖が抑制される傾向がみられた。同様の条件でU-87MGとBeckerを6時間前培養し、0,1×10^<-7>,10^<-9>,10^<-11>Mの濃度になるようにメラトニンを添加した。その後、室温(約25℃)で4Gy(線量率約0.9Gy/min)のガンマ線照射を行い、48時間後に細胞数を計測した。U-87MGでは、0Mと比較して他の全てのメラトニン濃度において細胞の増殖が抑制される傾向にあった。一方、Beckerでは、どの濃度のメラトニンにおいても細胞の増殖抑制はみられなかった。メラトニンには、ある種の中枢神経系悪性腫瘍に対して増殖を抑制する働きがあることが示唆された。また一方で、腫瘍細胞によっては、その細胞保護作用から放射線感受性を低下させる可能性があることも考えられた。

The anti-tumor effect and cytoprotective effect of tumor cells are reported in this paper. In addition, the central nervous system has a variety of anti-tumor effects and changes in sensitivity to radiation exposure. 96-point culture medium, 100μl culture medium (minimum essential culture medium +10% fetal serum + serum 100U/ml+ culture medium 100μg/ml) and 5×10^3 seeds of human neuroglioma cell line U-87MG and Becker After that, CO_2 concentration was increased to 37℃ and CO_2 concentration was increased to 5%,then cell culture was performed. The cells were seeded 6 hours before culture, 6 hours after culture, 24 hours after culture, and 48 hours after culture. The cells were added 10μl and the absorbance (450nm) was determined. After 6, 24, and 48 hours, U-87MG was multiplied by 1.3±0.1 times, 2.0 ±0.2 times, and 4.5 ±0.2 times, Becker by 1.4±0.1 times, 2.1 ±0.2 times, and 3.0 ±0.1 times, respectively. 100μl of U-87MG and Becker 5×10^3 seeds, 24 hours before culture under the same conditions After addition, cell counts were measured in the same manner at concentrations of 0, 1 ×10 <-7>^, 10 <-9>^<-11>, 10 ^<-13>M and 48 hours. U-87MG, Becker, 0M, 1×10^<-7>, 10 ^<-9>, 10 ^<-11>M, and 10 M have a tendency to inhibit cell proliferation in culture. Under the same conditions, U-87MG and Becker were incubated 6 hours ago, and concentrations of 0, 1 ×10 <-7>^, 10 <-9>^, and 10 ^<-11>M were added. After irradiation, the number of cells was measured at room temperature (about 25℃) at 4 Gy (dose rate about 0.9 Gy/min) and 48 hours after irradiation. U-87MG has a tendency to inhibit cell proliferation by comparing its total concentration with 0M. Becker's cell proliferation was inhibited. The central nervous system has a large number of tumors. The cell protection effect of the tumor cells was studied.