ヒト精巣セミノーマ細胞株における低酸素培養とVEGF-Cに関する検討

人睾丸精原细胞系缺氧培养及VEGF-C的研究

• 批准号: 16790932
• 负责人: 石村 武志
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Kobe University (2005)Kawasaki Medical School (2004)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16790932/
• 关键词: VEGF-C; ヒト精巣セミノーマ; 低酸素

VEGF-Cは癌のリンパ行性転移に重要であると考えられている。今回、ヒト精巣セミノーマ細胞株において、低酸素培養のVEGF-Cの発現とその発現機序に関して検討した。細胞株はヒト精巣セミノーマ細胞株(JKT-1)を用い、低酸素培養は1%と5%O_2下で行った。遺伝子発現は半定量的なmultiplex RT-PCR法、蛋白発現はWestern blotting法、シグナル系の解析は各々inhibitorを用いて検討を行った。5%O_2の低酸素培養ではVEGF-Cの発現の変化は認めなかったが、1%O_2の低酸素培養では16時間後より遺伝子発現の増加を認め、24時間後より蛋白発現の増加を認めた。シグナル系の検討では、低酸素培養にて高発現となるVEGF-Cの遺伝子発現は、MEK1のinhibitorであるPD098059添加では変化は認めなかったが、phophahdylinositol 3-kinase(PI3K)のinhibitorであるLY294002添加では有意に抑制された。ヒト精巣セミノーマ細胞株において、1%O_2の低酸素培養で、リンパ行性転移に関与するとされるVEGF-Cの発現が、遺伝子・蛋白レベルともに亢進し、PI3K signaling pathwayの関与が示唆された。

VEGF-C is important for cancer progression. In this paper, we discuss the mechanism of VEGF-C development in vitro and in vitro Cell line JKT-1 was cultured in medium and low pH medium at 1% and 5% O2. Gene discovery is semi-quantitative multiplex RT-PCR, protein discovery is Western blotting, and protein analysis is performed using various inhibitors. The expression of VEGF-C was increased after 16 hours in 5%O_2 and 1%O_2 low acid medium, and the expression of VEGF-C was increased after 24 hours in 1%O_2 low acid medium. In addition to PD098059, the inhibitor of MEK1 was added to the inhibitor of phophahdylinositol 3-kinase(PI 3K). The expression of VEGF-C, protein, PI3K signaling pathway and expression of VEGF-C were studied in vitro.