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スペルミン合成酵素遺伝子の機能解析と植物分子育種への応用に関する研究

精胺合酶基因功能分析及其在植物分子育种中的应用研究

基本信息

批准号：
05F05640
负责人：
森口卓哉
金额：
$ 1.54万
依托单位：
National Agriculture and Food Research Organization
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

ポリアミンの生合成系に関わる2種類のスペルミン合成酵素遺伝子(ACL及びSPMS)の生理的役割分担の解明のために、酵母のTwo-hybridシステムにより、ACL5タンパク質と相互作用を有する遺伝子を明らかにすることを目的とした。そのため、DNA結合ドメインを有するプラスミドベクターにACL5を連結し、転写活性ドメインを有するプラスミドにはACL5遺伝子が高発現している組織由来のcDNAライブラリーを挿入して、酵母two-hybridを行った結果、S-adenosylmethionine synthaseとtranslation elongation factor 1Aを同定した。一方、これらタンパク質はSPMSとは相互作用を示さず、このことからもACL5とSPMSの生理的役割の違いが推察された。これら酵素とACL5が相互作用を示す理由について知見を得るためにノーザンプロット解析を行い、論文として取り纏めて投稿中である。また、これら2種類のスペルミン合成酵素遺伝子の生理的役割分担のもう一つの解明手法として、両遺伝子を過剰発現させた組換え体トマトの作成を試みた。そのために、ACL5とSPMSについて、アグロバクテリウム法用のコンストを構築してトマトへの感染を筑波大学と共同して実施した。SPMSについては数個体の組換えトマトが得られた。ACL5については引き続き導入を行っている。さらに、研究室ではポリアミン生合成県連酵素遺伝子の一つであるスペルミジン合成酵素遺伝子(SPDS)を導入して過剰発現させたセイヨウナシ組換え体を保有している。そして、組換え体#32については環境ストレスに耐性を示すことが明らかとなっている。そこで、組換えセイヨウナシ#32を用いて、そのストレス耐性機構について情報を得るため、SODなどの抗酸化酵素の活性について測定しているところである。

The biological synthesis of protein is related to two kinds of protein synthase genes (ACL and SPMS), and the physiological function sharing and understanding of yeast, Two-hybrid system, ACL5 and protein interaction are related to protein synthesis. DNA binding factors such as DNA binding factors, ACL5 linkage factors, DNA activity factors, and tissue-derived cDNA binding factors such as yeast two-hybrid, and S-adenosylmethionine synthase translation elongation factor 1A were also determined. A side, the quality of the SPMS and the interaction between the ACL and the SPMS, the physiological separation and the detection of the SPMS. The enzyme and ACL5 interact with each other to show the reason for the interaction. The physiological function of the two kinds of enzymes is divided into two parts: the first part is the explanation method, the second part is the development method, the third part is the preparation method ACL5 SPMS SPMS SPMS ACL5 is the default language. In the laboratory, the introduction of SPDS into the genome and the preservation of SPDS in the genome are discussed. For example, if you change your body #32, you will be able to change your environment. The activity of SOD and anti-acidifying enzyme was determined by the method of enzyme analysis.