植物及び微生物の代謝産物を利用したアフラトキシン生産阻害法の研究

利用植物和微生物代谢产物抑制黄曲霉毒素产生的方法研究

• 批准号: 05F05644
• 负责人: 矢部 希見子
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: National Agriculture and Food Research Organization (2006)National Food Research Institute (2005)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05F05644/
• 关键词: アフラトキシン; アフラトキシン生産阻害菌; 微生物の同定; PCR; 生育阻害微生物

カビによって生産されるアフラトキシンは、自然界で最も発ガン性が高く、また強力な急性毒性を示す物質である。アフラトキシンによる穀物汚染は世界的に深刻な問題となっているが、現在までのところ実用化可能なアフラトキシン汚染の効果的防御法は得られていない。一方、自然界に存在する微生物は99%が未知であると言われ、その探索からあらゆる種類の有用物質を産生する微生物が見出される可能性がある。本研究では土壌や植物体など自然界に存在する種々の微生物の中からアフラトキシン生産阻害菌を単離し、それらが作るアフラトキシン生産阻害物質を発見し、実際に阻害物質を精製することを目的とする。18年度は、17年度に同定したタイ土壌由来の抗真菌活性を有する微生物から、抗真菌活性物質の精製を行った。まず、阻害微生物をグルコース・酵母エキスを含む培養液で培養後、培養液に阻害活性が含まれることを確認した。その後、有機溶媒抽出条件を検討したが抽出最適条件の設定には至らなかった。そこで、種々のクロマトグラフィー手法を利用して、阻害物質の精製を試みた。培養液をDiaion HP-20カラムに添加した後、種々の濃度のメタノール水溶液で溶出させ、各画分を濃縮後、阻害活性を検討した。活性のある画分をさらに薄層クロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィーを用いて精製した。その結果、2種類の阻害物質が得られ、これらはいずれも280nmの吸収を示し、分子量は1000以上であることなどから、リポ蛋白であることが予想された。19年度はこの物質の作用機構を調べ、成果をまとめる予定である。

The most toxic substances in nature are highly toxic and highly toxic. Grain pollution is a profound problem in the world, and now it is possible to prevent it from happening. 99% of microorganisms that exist in nature are unknown, unknown, This study aims to isolate, purify and purify harmful substances produced by microbial species that exist in soil and plants and in nature. In 2018 and 2017, the antifungal activity of the soil was determined. The microbial activity and the purification of antifungal active substances were determined. After incubation, the inhibition activity of the culture solution was confirmed. After that, the organic solvent extraction conditions were discussed and the optimum extraction conditions were set. The method of purification of harmful substances After the addition of Diaion HP-20 to the culture medium, the concentration of the seed was determined by the dissolution of the aqueous solution, the concentration of each component, and the inhibition activity. Active liquid separation, thin layer separation, high speed liquid separation and purification As a result, two kinds of harmful substances were obtained, and the absorption of 280nm was observed, and the molecular weight was more than 1000. 19 years ago, the material function of the organization was adjusted, and the results were determined.