C型肝炎ウイルスのゲノムRNA複製機構の解析

丙型肝炎病毒基因组RNA复制机制分析

• 批准号: 05J02018
• 负责人: 宮成 悠介
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: National Institute of Genetics (2006)Kyoto University (2005)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05J02018/
• 关键词: HCV; ウイルス; 複製メカニズム; ウイルス粒子産生; 複製複合体; RNA; ウイルス粒子形成

C型肝炎ウイルス(HCV)はフラビウイルス科に属するプラス鎖RNAウイルスである。現在、世界の人口の約3%がHCVに感染している。HCV感染によって高率に慢性肝炎が引き起こされ、その後長い期間を経て肝硬変さらには肝がんへと病態が確実に変化していき、C型肝炎は予後の悪い深刻な感染症と言える。現在のところ、C型肝炎への治療としてはインターフェロンとリバビリンの併用療法が主に採用されており、約40%の感染患者に対してのみ有功である。より有効な抗HCV薬の開発が期待されるが、そのような薬は未だに開発されていない。新薬開発の為に、HCVの生活環に関する分子生物学的な研究が強く求められている。そこで、HCVゲノムのRNA複製機構およびウイルス粒子産生機構を明らかにすることを目的として研究をおこなった。C型肝炎ウイルス(HCV)の感染によって肝硬変さらには肝がんが引き起こされる。HCV粒子の構成因子であるCore(キャプシド)は細胞内の脂肪滴(lipid droplet, LD)の表面、E1, E2(エンベロープ)は小胞体の内腔に局在することが既に知られている。しかしながら、これまで感染性HCV粒子を産生する系が存在しなかつたために、HCV粒子形成機構は全く明らかとされていなかった。最近になって感染性のウイルス粒子を放出することのできる培養細胞系が報告された(Nature Medicine.'05)。HCVのウイルス粒子産生機構をを明らかにする為に、蛍光顕微鏡および電子顕微鏡を用いてHCVタンパク質、HCV RNA、複製複合体の細胞内局在を詳細に解析し、以下のことを明らかとした。(1)Coreタンパク質が他のHCVタンパク質,HCV RNA,複製複合体を小胞体から脂肪滴周辺にリクルートする。(2)Coreタンパク質は脂肪滴の形成、さらに脂肪滴の周辺に脂質二重膜(LD-associated membrane)の形成を誘導し、他のHCVタンパク質はその二重膜上に局在する。(3)感染性のウイルス粒子形成にはこれらHCVタンパク質の脂肪滴周辺への局在が必須であり、LD-associated membrane上でウイルス粒子形成反応がおこなわれている。これまでHCVのウイルス粒子形成は小胞体膜上でおこなわれていると推測されていたが、小胞体ではなくLD-associated membrane上でおこなわれていることが明らかとなった。脂肪滴は生体内の多くの細胞内に存在し、中性脂質の貯蔵庫としてしか考えられていなかったが、ウイルス粒子産生の足場としての新たな側面が明らかとなり、本研究は細胞生物学的にも非常に意義のある研究であると考えられる。

Hepatitis C virus (HCV) is a virus that can cause viral hepatitis. About 3% of the world's population is now infected with HCV. HCV infection is high, chronic hepatitis is high, hepatitis C is high, chronic hepatitis is high, chronic hepatitis is high, hepatitis C is high, chronic hepatitis is high, chronic hepatitis is high, At present, the treatment of hepatitis C and hepatitis C is mainly used in combination therapy, and about 40% of infected patients are affected. The development of anti-HCV drugs is expected to be completed in 2010. Molecular biology research related to the development of new drugs and the life cycle of HCV has been intensified. The RNA replication mechanism of HCV and its particle generation mechanism are discussed in detail. Hepatitis C virus (HCV) infection causes liver cirrhosis. HCV particle components are known to be located on the surface of lipid droplets (LD), E1, E2, and in the lumen of small cells. There is no mechanism for the production of infectious HCV particles, and the mechanism for the formation of HCV particles is completely clear. Recently, cultured cell lines have been reported for infectious disease particle release (Nature Medicine). '05)。The mechanism of HCV particle production was analyzed in detail by optical microscopy and electron microscopy, and the intracellular structure of HCV protein, HCV RNA and replication complex was analyzed in detail. (1)Core protein,HCV RNA, replication complex, microsome, fat drop, peripheral protein. (2) The Core protein induces the formation of lipid droplets and the formation of LD-associated membrane around the lipid droplets, and other HCV proteins are present on the LD-associated membrane. (3)Infectious particles are formed on the LD-associated membrane. HCV particles are formed on small cell membranes, presumably on LD-associated membranes. There are many intracellular lipid deposits in fat droplets, and the storage of neutral lipids is very important for cell biology.

项目成果

Supression of Hepatitis C virus replicon by TGF-beta

TGF-β 对丙型肝炎病毒复制子的抑制

• 发表时间: 2005
• 期刊: Virology 331(2)
• 作者: M.Fujisawa;T.Hata;H.Kitagawa;P.Bronsveld;Y.Suzuki;K.Hasezaki;Y.Noda;Y.Imamura;竹花 洋佑;竹花 洋佑;竹花洋佑;Takehana Yosuke;竹花 洋佑;竹花 洋佑;Watashi K et al.;Murata T et al.
• 通讯作者: Murata T et al.

Cyclophilin B is a functional regulator of hepatitis C virus RNA polymerase

• DOI: 10.1016/j.molcel.2005.05.014
• 发表时间: 2005-07-01
• 期刊: MOLECULAR CELL
• 影响因子: 16
• 作者: Watashi, K;Ishii, N;Shimotohno, K
• 通讯作者: Shimotohno, K

自然免疫

自然免疫力

• 发表时间: 2005
• 作者: M.Fujisawa;T.Hata;H.Kitagawa;P.Bronsveld;Y.Suzuki;K.Hasezaki;Y.Noda;Y.Imamura;竹花 洋佑;竹花 洋佑;竹花洋佑;Takehana Yosuke;竹花 洋佑;竹花 洋佑;Watashi K et al.;Murata T et al.;日比 紀文ら
• 通讯作者: 日比 紀文ら