神経細胞における小胞体ストレスの生体内可視化-神経変性疾患の病態解明を目指して-
神经细胞内质网应激的体内可视化 - 旨在阐明神经退行性疾病的病理学 -
基本信息
- 批准号:05J02848
- 负责人:
- 金额:$ 1.73万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for JSPS Fellows
- 财政年份:2005
- 资助国家:日本
- 起止时间:2005 至 2007
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
神経細胞の樹状突起における小胞体ストレス応答を確認・可視化するためにマウス海馬初代培養を用い実験を行った。小胞体ストレス負荷により細胞体だけでなく樹状突起内においても小胞体ストレス応答系の下流(標的)分子[GRP78/Bip(小胞体分子シャペロン),eIF2α-P(リン酸化eIF2α)]が上昇した。更に、小胞体ストレスセンサー(ATF6,IRE1, PERK)のGFP融合発現ベクターを作製し、神経細胞に導入したところ、三つのセンサーが神経細胞の細胞体の小胞体だけではなく樹状突起内の小胞体にも局在した。次に神経細胞にIRElを導入し小胞体ストレスを負荷し抗IRE1リン酸化抗体による免疫染色を行った。その結果ストレスなしではIRE1のリン酸化は起きないのが、小胞体ストレス負荷後、リン酸化が細胞体周辺だけではなく樹状突起上でも起こることが観察された。次にIRElの下流分子であるXBP1に対するin situ hybridizationを行った。その結果神経細胞に導入したXBPlmRNAに対するシグナルは細胞体と近位の樹状突起から検出された。引き続いてXBP1 mRNAが脱分極(KC1)や小胞体ストレス時に樹状突起への移行パターンが変動しないかの検討を行った。その結果、これらの刺激でXBP1 mRNAの局在に変化はなかった。以上の結果は樹状突起内の小胞体において局所的な小胞体ストレス応答が起こりうること、つまりタンパク質の品質管理能力を保持する可能性を示唆している。次に樹状突起上のグルタミン受容体を過剰に刺激することが小胞体ストレスにつながるかをカイニン酸処理にて検証したところ、カイニン酸処理後の神経細胞においてXBP1mRNAのスプライシングは確認できなかった。このことはカイニン酸処理では小胞体ストレスを誘導しないことを示している。
The dendritic process of neurons was identified and visualized in the primary culture of hippocampus. The molecular level [GRP78/Bip, eIF2 α-P] in the cellular system was elevated within the dendrites. In addition, GFP fusion in cell bodies (ATF6,IRE1, PERK) is controlled by the introduction of GFP into neurons, and GFP fusion in cell bodies of neurons is controlled by the incorporation of GFP into dendritic cells. In addition, IRE1 was introduced into the neurons and the cells were loaded with anti-IRE1 antibodies. As a result, the cells were acidified and the dendrites were raised. XBP1 in situ hybridization As a result, XBPL mRNA was introduced into the neurons and the dendrites were removed from the cells. XBP1 mRNA is depolarized (KC1), and the dendrites migrate from cell to cell. XBP1 mRNA is expressed in a variety of ways. The above results indicate the possibility of maintaining the quality control ability of the small cells in the dendrites. XBP1 mRNA expression in neurons after acid treatment was confirmed by the stimulation of the receptor on the dendrimer. The acid treatment of small cells can be induced by the acid treatment.
项目成果
期刊论文数量(5)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Endoplasmic reticulum stess response in dendrites of cultured primary neurons
培养的原代神经元树突中的内质网应力反应
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Murakami T;Hino S-I;Saito A;Imaizumi K
- 通讯作者:Imaizumi K
Endoplasmic reticulum stress response in dendrites ofcultured primary neurons
培养原代神经元树突的内质网应激反应
- DOI:
- 发表时间:2007
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Murakami T;Hino S-I;Saito A;Imaizumi K.
- 通讯作者:Imaizumi K.
BBF2H7, a novel transmecbrane bZIP transcription factor, is a new type of ER stress transducer
BBF2H7是一种新型跨膜bZIP转录因子,是一种新型内质网应激传感器
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Kondo S;Saito A;Hino S-I;Murakami T;Ogata M;Kanemoto S;Nara S;Yamashita A;Yoshinaga K;Hara H;Imaizumi K
- 通讯作者:Imaizumi K
Molecular mechanisms responsible for aberrant splicing of SERCA1 in myotonic dystrophy type 1
- DOI:10.1093/hmg/ddm239
- 发表时间:2007-12-01
- 期刊:
- 影响因子:3.5
- 作者:Hino, Shin-ichiro;Kondo, Shinichi;Imaizumi, Kazunori
- 通讯作者:Imaizumi, Kazunori
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