下垂体前葉細胞間情報伝達因子としての免疫制御因子,IL-18の新たな機能の解析

免疫调节因子IL-18作为垂体前叶细胞间通讯因子的新功能分析

• 批准号: 05J05032
• 负责人: 永井 康裕
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05J05032/
• 关键词: IL-18; BAPC-1; スライス培養; 下垂体前葉; B7-H3; 免疫抑制; immuno-endocrine; 下垂体由来前葉細胞株; 炎症性サイトカイン; marginal cell layer; 牛下垂体前葉細胞株; 幹細胞・前駆細胞関連遺伝子; Immuno-endocrineネットワーク

インターロイキン18(IL-18)は、炎症性サイトカインの一種で、細胞性ならびに液性免疫の反応を促進するユニークなサイトカインであり、サイトカインネットワークの上位に位置する。本研究では下垂体前葉細胞におけるIL-18の作用とその機構を解明することを目的とする。本年度は研究計画に従い遂行し、以下の新知見が得られた。1.IL-18のGH分泌に及ぼす影響を下垂体前葉スライス培養法で解析した。ウシ下垂体を採取後、中葉と後葉を取り除き、マイクロスライサーを用いて150μmの前葉切片を作製し、培養した。前培養を一晩行った後、IL-18刺激前5時間と刺激5時間の培養上清を回収し、GH濃度をRIA法で測定した。また、培養後のスライス切片は、4%PFA/PBSで固定後、パラフィン包埋し、免疫組織学的解析に供した。IL-18シグナル伝達因子であるMAPKp38とSTAT3の陽性反応は、無刺激切片に比べIL-18切片で強く核に局在した。一方、IL-18刺激したスライス培養切片(IL-18切片)では、GHの染色性は低下する傾向を示した。しかし、IL-18刺激によって、培養上清中のGH濃度は、コントロールと比較して有意な変化は起こらなかった。このことより、スライス培養切片において、IL-18はGH細胞に機能的に作用するが、GH分泌に影響しないものと考えられる。2.BAPC-1とPBMCを共培養することによりBAPC-1に発現するB7-H3分子の機能解析を試みた。BAPC-1とPBMCを共培養した区では、PBMCにおけるCD25の発現が、単培養区と比較して有意に上昇した。一方、12B抗体を添加した共培養区では、通常の共培養区と比較してさらに有意にCD25の発現が上昇したことから、B7-H3分子が12B抗体によって阻害されることによって、PBMCの活性化が上昇することが示された。以上のことより、B7-H3分子は、ウシにおいても免疫機能を抑制的に制御することが示された。

The symptoms of IL-18, inflammation, cellular immunity, liquid immunity, and epigastric position were detected. The purpose of this study was to clarify the role of IL-18 in the anterior pituitary cells. This year, the research project has been successfully carried out, and the following new insights have been approved. 1.IL-18 "GH secretion" and "shadow" of anterior pituitary gland were analyzed by culture method. After the pituitary gland was removed, the pituitary gland was removed, and the anterior section of the pituitary gland was made with the front section of 150 μ m. After pre-incubation, the supernatant was stimulated 5 hours before IL-18 stimulation, and the supernatant was tested by GH and RIA method. After culture, the sections were cut, the 4%PFA/PBS was fixed, the tumor was embedded, and the analysis of immunology was used. The expression factors of IL-18, MAPKp38, STAT3, and stimulation sections were stronger than those of IL-18 sections. On the other hand, IL-18 stimulated the section (IL-18 section) and the GH showed hypochromatism. The concentration of GH in the supernatant was significantly higher than that in the supernatant of the supernatant, and that of the supernatant was significantly higher than that of the supernatant. The effects of IL-18, GH, and GH secretion on slices were studied. The 2.BAPC-1 PBMC system has been developed to test the ability of the B7-H3 molecular machine to parse through BAPC-1. BAPC-1, PBMC, PBMC, CD25, and so on, are more likely to be found than intentionally. On one side, the 12B antibody was added to the co-culture zone, the co-culture zone was usually co-cultured, the CD25 was intentionally detected, the B7-H3 molecule was blocked by 12B antibody, and the PBMC was activated. The above-mentioned antigens, B7-H3 molecules, and antigens that can be suppressed by the immune mechanism are shown to be sensitive.

项目成果

Expression of inflammatory related factors in porcine anterior pituitary derived cell line.

猪垂体前叶来源细胞系炎症相关因子的表达。

• 发表时间: 2008
• 期刊: Veterinary Immunology and Immunopathology (In press)
• 作者: Tunjung WAS;Miyake Y;Yokoo M;Sato E.;Nagai Y.
• 通讯作者: Nagai Y.

Characters and functions of anterior pituitary progenitor cells that are identifi edby a novel monoclonal antibody

新型单克隆抗体鉴定垂体前叶祖细胞的特征和功能

• 发表时间: 2007
• 作者: Shimosato;T.;渡邉一史;佐藤裕尚;小笠原英毅;麻生 久;渡邉一史;M. Sanosaka;Hisashi Aso;Hisashi Aso;麻生 久;永井康裕;小笠原英毅;永井康裕;佐野坂真人;Y. Nagai
• 通讯作者: Y. Nagai

下垂体前葉未分化細胞を認識する新規モノクローナル抗体の作製とその特性調査

新型识别未分化垂体前叶细胞单克隆抗体的制备及其特性研究

• 发表时间: 2007
• 作者: Shimosato;T.;渡邉一史;佐藤裕尚;小笠原英毅;麻生 久;渡邉一史;M. Sanosaka;Hisashi Aso;Hisashi Aso;麻生 久;永井康裕;小笠原英毅;永井康裕
• 通讯作者: 永井康裕

ウシ下垂体前葉の未分化細胞膜抗原の検索

牛垂体前叶未分化细胞膜抗原的寻找

• 发表时间: 2007
• 作者: Shimosato;T.;渡邉一史;佐藤裕尚;小笠原英毅;麻生 久;渡邉一史;M. Sanosaka;Hisashi Aso;Hisashi Aso;麻生 久;永井康裕
• 通讯作者: 永井康裕

Cellular localization of IL-18 and IL-18 receptor in pig anterior pituitary gland.

猪垂体前叶 IL-18 和 IL-18 受体的细胞定位。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Domestic Animal Endocrinology 30
• 作者: Tadashi Yamasaki;Koji Tahara;Shoichi Takano;Miho Inoue-Murayama;Michael T. Rose;Takeshi Minashima;Hisashi Aso;Shin'ichi Ito;M.Tohno;Yuko Miyake;Kohtaro Miyazawa;Kohtaro Miyazawa;Nagai Y.
• 通讯作者: Nagai Y.