天然生理活性物質トウトマイセチンを用いたPP1阻害による細胞内情報伝達の網羅解析

利用天然生理活性物质互变霉素综合分析PP1抑制的细胞内信号转导

• 批准号: 05J08774
• 负责人: 三橋 進也
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05J08774/
• 关键词: プロテインホスファターゼ; PP1; トウトマイセチン; TNF; NF-kappaB; IKK; EGF; Raf

本研究では従来の生化学的手法に加え、1型プロテインホスファターゼ(PP1)の初めての特異的阻害剤トウトマイセチン(TC)、および質量分析装置等の新技術を組み合わせて使用し、特に細胞膜直下のリン酸化タンパク質の網羅的な解析を行う。そして、その成果によって癌、糖尿病および免疫系をはじめとする生命科学分野に新たな展開をもたらし、さらにTCの臨床薬剤としての応用も目指す。明らかになったこと:(1)様々な抗リン酸化抗体による実験結果から、2A型ホスファターゼ(PP2A)が、細胞内のほとんど全てのリン酸化セリン・スレオニンを基質とするのに対して、PP1は基質特異性が大きい。(2)トウトマイセチンで処理した細胞ではサイトカインTNFによる転写因子NF-κBの活性化が抑制される。この事実は、トウトマイセチンがNF-κBの上流であるキナーゼIKKの活性化を抑制する事を示している。またIKKとPP1は恒常的に結合しており、TNF刺激後はIKKの活性の減少と同様な時間経過での受容体へのPP1の結合と解離が観察された。このことからPP1はTNF/NF-κB経路の受容体付近に基質タンパク質をもっており、PP1はTNF/NF-κB経路を正に制御していると示唆される。(3)様々なシグナル伝達系路を調べた結果、PP1はDNA修復および細胞周期制御に重要なATMの基質を脱リン酸化することが示唆された。ATMの基質で有名な分子はp53であるが、本研究では異なった分子が見出され、リン酸化の部位も推定された。そこで、本年度はこれまでの成果、特に上記(3)で得られたPP1がTNF/NF-κBを正に制御しているという報告者は実験結果を論文として纏め、投稿中である。PP1のさらなる基質を探索すると共に、上記(4)で得られたATMの基質に関して、がんとの関連が推測されるので今後の研究課題として重要であると思われる。

This research is based on the biochemical method of に加え, type 1 プロテインホスファターゼ(PP1) の初めてのspecific inhibitor トウトマイセチン( TC), および mass analyzer and other new technologies are combined and used, and the special のリン acidification and のンパク mass analysis net are used directly under the cell membrane. Cancer, diabetes, immunology, life sciencesに新たな开户をもたらし、さらにTCの Clinical 薬剤としての応用も目见す.明らかになったこと: (1)様々なanti-リン acidified antibody による実験RESULTS から、type 2A ホスファターゼ(PP2A)が, intracellular のほとんど全てのリン acidified セリン・スレオニンを matrix とするのに対して, PP1 は matrix-specific が大きい. (2) Treating cells with TNF-activated TNF and inhibiting the activation of NF-κB factor.この事実は, トウトマイセチンがNF-κBの上流であるキナーゼIKKのactivationを inhibits する事をshowしている. There is a constant binding and dissociation of IKK and PP1, and a decrease in the activity of IKK after TNF stimulation, and a time-dependent binding and dissociation of the acceptor of IKK and PP1.このことからPP1はTNF/NF-κB経路のacceptor pay close to the matrix タンパクqualityをもっており, PP1はTNF/NF-κB経路を正にcontrol しているとshows instructing される. (3) The result of 様々なシグナル伝Da system, PP1, DNA repair, cell cycle control, and important, ATM, matrix, dehydration, acidification, and so on. The famous molecule of the ATM matrix is ​​でp53, and the molecule of this study is different and the molecule is not seen.そこで、This year's はこれまでのachievements、Special records(3)で得られたPP1がTNF/NF -κBを正にcontrolしているというreporterは実験RESULTSをthesisとして Matめ、submission in progressである. PP1のさらなるsubstrateをExplorationすると公に、The above note(4)でgetsられたATMのsubstrateに关して、がんとのrelatedがspeculationされるのでfuture research topicとしてimportantであると思われる.

项目成果

Low molecular weight lignin suppresses activation of NE-κB and HIV-1 promoter

低分子量木质素抑制 NE-κB 和 HIV-1 启动子的激活

• 发表时间: 2008
• 期刊: Bioorg. Med. Chem. 16
• 作者: Mitsuhashi S.;Kishimoto T.;et. al.
• 通讯作者: et. al.

低分子リグニンによるNF-kBの活性化の抑制

低分子量木质素抑制 NF-kB 活化

• 发表时间: 2008
• 作者: 三橋進也;岸本崇生;浦木康光;生方信
• 通讯作者: 生方信

ミコフェノール酸の新たな生理活性と構造機能相関

麦考酚酸的新生理活性及构效关系

• 发表时间: 2007
• 作者: 三橋 進也、竹中 淳一;ら
• 通讯作者: ら

タンパク質の翻訳後修飾解析プロトコール

蛋白质翻译后修饰分析方案

• 发表时间: 2006
• 作者: Oohashi T;Bekku Y;Houliston RS;Van Sorge NM;Van Sorge NM;Overell J;Koga M;Kamitani T;Tatsumoto M;Nagasawa K;Houliston RS;Yoshida T;Funakoshi K;Tatsumoto M;Komagamine T;Gono T;Yuki N;Kimoto K;Comin R;Koga M;Koga M;Koga M;Pandey JP;Yuki N;Li J;Yuki N;Odaka M;Odaka M;Koga M;Hiraga A;Kuwabara S;Goodfellow JA;Takahashi M;Tatsumoto M;Kamitani T;S. Matsumiya;K. Kato;S. Matsumiya;K. Kato;Y.Wada;矢木宏和;S.Matsumiya;山口芳樹;C.-T.Guo;K.Kato;M.Holland;Y.Yamaguchi;K.Talabnin;Y.Kamiya;S.-J.Yoon;Y.Yamaguchi et al.;M.Holland et al.;Y.Yamaguchi et al.;Y. Kamiya;Y. Kamiya;T.Kimura et al.;H.Yagi et al.;Y.Kamiya et al.;S.Sekiya et al.;N.Takahashi;Y.Yamaguchi;Y. Yamaguchi;Y. Yamaguchi;Y.Yamaguchi;矢木宏和 他
• 通讯作者: 矢木宏和 他

Mycophenolic acid as a latent agonist of PPARγ

霉酚酸作为 PPARγ 的潜在激动剂

• 发表时间: 2007
• 期刊: Bioorg. Med. Chem. Lett. 17
• 作者: M. Ubukata;他9名 (1番目)
• 通讯作者: 他9名 (1番目)