ラット警報フェロモンの単離精製

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本年度に得られた成果の概要は以下の通りである1.吸着剤の改良:前年度の結果より水は警報フェロモン分子を捕捉できることが明らかとなったものの、水はフェロモン分子同定へ向けての解析にとっては最適な吸着剤であるとはいえない。そのため、最も簡便な生物検定法である聴覚性驚愕反応試験を用いて、新たな吸着剤を選定した。その結果、フェロモン含有空気を吸引したTENAXを透過させた水は、フェロモンを直接的に捕捉させた水と同様の反応を引き起こしたため、TENAXはフェロモンを捕捉可能であることが明らかとなった。またエーテルを用いても同様の結果が得られたことより、警報フェロモンはエーテル可溶性であることも明らかとなった。2.試料の解析によるフェロモン分子同定:警報フェロモンは揮発性物質であるため、その分析にはGC/MSを用いる必要がある。GC/MSを用いて、上記の方法で得られた警報フェロモン含有エ一テルを分析することで、フェロモン分子を解析した。その結果、フェロモン含有試料特異的に含まれる候補物質を同定した。現在、この候補物質がフェロモン物質であるかを確認中である。3.フェロモン受容系の特定:驚愕反応試験は簡便であるものの、警報フェロモンの生物学的研究には不向きな実験系である。そのため前年度に確立したホームケージにおけるフェロモン提示方法を用いて、鋤鼻器摘除レシピエントに警報フェロモンを提示し、その後の反応を観察することで、警報フェロモン受容における鋤鼻系の役割を生物学的に検討した。無処置および偽処置レシピエントにおいて観察された体温上昇反応の増強は、レシピエントの鋤鼻器を摘除することで観察されなくなった。また、Habituation/dishabituation testの結果より、いずれの群のレシピエントもマウス尿の匂いを感知するとともに2種類のマウス尿の匂いを嗅ぎ分けることが可能である、ということが示された。以上の結果より、警報フェロモンは鋤鼻器で受容されることが判明した。