転写因子NRF2を介したミトコンドリア電子伝達系遺伝子の発現制御機構の解明

转录因子NRF2介导的线粒体电子传递链基因表达控制机制的阐明

• 批准号: 05J12131
• 负责人: 林 立平
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05J12131/
• 关键词: 分子生物学; 細胞生物学; ミトコンドリア; 転写制御; 転写因子; クロストーク

哺乳類転写因子NRF-2は、ミトコンドリアでのATP産生に関わる遺伝子の転写を制御することが知られる。本研究では、NRF-2の転写補因子を同定することを目的とし、NRF-2に複数のタグを付けたconstructをヒト培養細胞にて発現し、affinity精製によってNRF-2を含む転写複合体を精製することを目指したが、NRF-2に有意に結合する核内蛋白質は同定することができなかった。しかし、NRF-2の転写促進活性を担うβサブユニットとγサブユニット(両者は同一遺伝子座にコードされている)で、核内に局在する効率が異なることを見出し、それによりβ/γで転写促進活性に差が生じることを明らかにした。さらに、高効率の核局在にはβサブユニットにuniqueなC末leucine zippermotifが必要であることを示した。これまでの研究から、C末leucine zipperはβサブユニットのdimer化と転写促進の両方に必要であること、両者は機能的に同一であることが示唆されていたが、本研究では、GAL4 DNA binding domain融合NRF-2βの転写促進活性を調べる実験から、C末leucine zipperは、dimer化した後の転写促進には必要ではなく、NRF-2αβ複合体がheterodimerの状態で、つまりNRF-2βがdimerを形成していない状態でpromoterに結合しているときにのみ転写促進に寄与することを明らかにした(投稿準備中)。本研究により、NRF-2βのC末leucine zipperの核局在と転写促進の両側面での役割が明らかにされた。

Mammalian transcription factor NRF-2 is known to be involved in the regulation of transcription of genes in ATP production. The purpose of this study is to identify the NRF-2 gene complement factor, NRF-2 gene construct, affinity purification, NRF-2 gene complement complex purification, and NRF-2 gene construct. NRF-2's write-promoting activity varies from β to γ to β/γ, and from β to γ to β/γ. The nuclear power station has a high efficiency. This research shows that the C-terminal leucine zipper is necessary for the dimerization and writing promotion of β-NRF-2 beta dimer is formed in the state of promoter, which is combined with NRF-2 beta dimer. In this study, NRF-2β and C-terminal leucine zippers were used to promote the development of NRF-2 β.

项目成果

Nuclear respiratory factor 2 activates transcription of human mitochondrial translation initiation factor 2 gene

• DOI: 10.1016/j.mito.2006.10.005
• 发表时间: 2007-05-01
• 期刊: MITOCHONDRION
• 影响因子: 4.4
• 作者: Hayashi, Rippei;Ueda, Takuya;Takeuchi, Nono
• 通讯作者: Takeuchi, Nono