抗腫瘍細胞活性を有す海洋無脊椎動物レクチンの分子細胞生物学

具有抗肿瘤细胞活性的海洋无脊椎动物凝集素的分子细胞生物学

• 批准号: 16J07090
• 负责人: 小出 康裕
• 金额: $ 0.83万
• 依托单位: Yokohama City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2016
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2016-04-22 至 2018-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16J07090/
• 关键词: レクチン; ガラクトース; ムラサキイガイ; イソゴカイ; MytiLec; 薄層クロマトグラフィー(TLC); スフィンゴ糖脂質; ファーイースタンブロッティング; SUELファミリー; 自然免疫; Gb3; MytiLec-1

海棲無脊椎動物由来のガラクトシド結合性レクチンの役割を明らかにする目的から、軟体動物二枚貝ムラサキイガイと環形動物イソゴカイから得たレクチンに対する抗体を作り、組織内の局在を免疫組織化学的に明らかにした。ムラサキイガイレクチンは、鰓や外套膜で高いシグナルを示すことが判明した。これは2016年に報じた、微生物の暴露によりMytiLecのmRNAが鰓や外套膜で高く転写される結果を支持した。イソゴカイから得たレクチンは、表皮と腸に高いシグナルを有することが判明した。それぞれの組織を部位別に分け、ハプテン糖を含む緩衝液で溶出した上清を電気泳動し、それぞれの抗レクチン抗体を用いて検出すると、どちらのレクチンも、組織の細胞が有するガラクトース糖鎖に結合して存在していることが認められた。これにより海棲無脊椎動物レクチンは、その存在様式として、リガンド糖鎖に結合せず遊離状態で存在するもの(カイメンレクチン、ウニ卵レクチン、ウミシダレクチン)と、リガンドに結合して存在するもの(ムラサキイガイレクチン、イソゴカイレクチン、スガイレクチン)に分類できることが判明した。糖鎖アレイを用い、ムラサキイガイレクチンはαガラクトースに、イソゴカイレクチンはβガラクトースに特異的に結合することが判明した。エラと外套膜から得られた抽出残渣を有機溶媒で抽出し、薄層クロマトグラフィー(TLC)を用いてムラサキイガイの糖脂質を分離できた。その中にはガラクトースを含む中性糖鎖を持つスフィンゴ糖脂質が存在することの示唆が、抗体を用いた解析から得られた。その後、TLCにより分離した糖脂質を疎水性膜に転写するファーイースタンブロッティングの手法を改良した。そして標識レクチンや抗体を用いた検出技術の向上を行ない、ムラサキイガイの組織中に含まれる、レクチンの内在性リガンド糖脂質の同定を継続している。

Marine invertebrate origin and binding activity, mollusc two shellfish, ring animal, anti-body activity, tissue localization and immunohistochemistry. The outer mantle of the mantle is high in the middle of the mantle, and the mantle is high in the middle. This is supported by the results of the 2016 report on microbial exposure to MytiLec mRNA and high levels of mantle expression. It's a good idea to have a good time. All tissues are separated into different parts, and the supernatant is dissolved in buffer solution containing glucose. All tissues are detected by anti-glucose antibody. The cells of tissues are bound to glucose. The classification of marine invertebrates is clearly defined by the existence formula of the invertebrate, the existence formula of the invertebrate. The sugar lock is used in the middle of the game, and the game is used in the middle of the game. The extraction residue of the mantle membrane was extracted by organic solvent, and the separation of sugar and lipid by TLC was carried out. In addition to the above, it is also possible to analyze the presence of sugar and lipid in the medium containing neutral sugar. After the separation of sugar and lipids, the method of preparation of aqueous membrane was improved. In addition, the identification and detection of antibodies in tissues contain the intrinsic properties of glucose and lipids.

项目成果

海洋無脊椎動物R型レクチンの局在

海洋无脊椎动物 R 型凝集素的定位

• 发表时间: 2017
• 作者: Hasan Imtiaj;Fujii Yuki;Kawsar Sarkar M.A.;Rajia Sultana;Sugawara Shigeki;Hosono Masahiro;Ogawa Yukiko;Kawakami Yasushi;Koide Yasuhiro;Yamamoto Daiki;Kanaly Robert A.;Ozeki Yasuhiro;小出康裕
• 通讯作者: 小出康裕

SUEL/RBL and Their Biomedical Applications

SUEL/RBL 及其生物医学应用

• DOI: 10.1201/9781315372303-22
• 发表时间: 2016
• 期刊: MARINE OMICS Principles and Application
• 作者: Koide Yasuhiro;Fujii Yuki;Hasan Imtiaj;Ogawa Yukiko;Rajia Sultana;Kawsar Sarkar M.A.;Kanaly Robert A.;Sugawara Shigeki;Hosono Masahiro;Hamako Jiharu;Matsui Taei;Ozeki Yasuhiro
• 通讯作者: Ozeki Yasuhiro

University of Trieste(イタリア)

的里雅斯特大学（意大利）

University of Rajshahi/University of Chittagong/Varendra University(バングラデシュ)

拉杰沙希大学/吉大港大学/瓦伦德拉大学（孟加拉国）

Structural glycobiology for lectin to promote advanced biomedical research

凝集素的结构糖生物学促进先进生物医学研究

• DOI: 10.1201/9781315371399-34
• 发表时间: 2016
• 期刊: Marine Glycobiology Principles and Applications
• 作者: Hasan Imtiaj;Fujii Yuki;Kawsar Sarkar M.A.;Rajia Sultana;Sugawara Shigeki;Hosono Masahiro;Ogawa Yukiko;Kawakami Yasushi;Koide Yasuhiro;Yamamoto Daiki;Kanaly Robert A.;Ozeki Yasuhiro
• 通讯作者: Ozeki Yasuhiro