呼吸リズム形成ニューロンの活動を制制する神経路の実験形態学的解析

控制呼吸节律形成神经元活动的神经通路的实验形态学分析

• 批准号: 16700304
• 负责人: 横田 茂文
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Shimane University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16700304/
• 关键词: pre-Botzinger complex; 結合腕傍核; 孤束核; ニューロキニン1レセプター; glutamic acid decarboxylase; ラット

前年度は、順行性標識法と免疫組織化学的手法を併用して光顕的あるいは電顕的に解析を進め、孤束核腹外側亜核(v1NST)およびKolliker-Fuse核(KF)からの投射線維が、pre-Botzinger complex(pre-BotC)に存在するニューロキニン1レセプター(NK1R)発現ニューロンへ直接連絡することを明らかにした。本年度は、軸索輸送を用いた標識法とGABA合成酵素であるglutamic acid decarboxylase 67 (GAD67)のmRNAを検出するin situ hybridization法、およびGAD67に対する免疫組織化学的手法を併用することにより、pre-BotCへ投射するv1NSTニューロンおよびKFニューロンがGABA作動性か否かについて解析した。まず、逆行性標識物質フルオロゴールド(FG)を電気泳動的にpre-BotCへ微量注入し、その個体のv1NSTあるいはKFにおけるFG標識ニューロンと、in situ hybridization法により検出したGAD67 mRNA発現ニューロンとの異同を観察した。その結果、v1NSTではFG標識されたGAD mRNA発現ニューロンが多数観察されたが、KFではほとんど観察されなかった。次に、順行性標識物質ビオチン化デキストランアミン(BDA)を電気泳動的にv1NSTへ微量注入し、その個体の延髄腹外側部におけるBDA標識終末と、NK1R発現ニューロンおよびGAD67を発現する神経終末の分布を観察した。その結果、NK1R発現ニューロンに近接するBDA標識神経終末の多くがGAD67に免疫応答を示ことが観察された。以上の結果から、pre-BotCニューロンへ投射するGABA作動性ニューロンの一部はv1NSTに存在することが明らかとなり、v1NSTはpre-BotCで形成される呼吸リズムに対して抑制性の影響を与えることが示唆された。

In the past year, anterograde labeling and immunohistochemical methods were used to analyze light and electricity in the ventral lateral nucleus of the nucleus tractus solitarius (v1NST) and Kolliker-Fuse nucleus (KF). The projection line dimension of the pre-Botzinger complex(pre-BotC) existed in the ventral lateral nucleus tractus solitarius (v1NST) and Kolliker-Fuse nucleus. This year, we analyzed axonal transport by using a combination of labeling, GABA synthase, glutamic acid decarboxylase 67 (GAD67) mRNA detection, in situ hybridization, and GAD67-related immunohistochemical techniques. To investigate the similarities and differences between the detection of GAD67 mRNA and the detection of GAD67 mRNA expression by the method of KF and in situ hybridization. The results showed that the expression of GAD mRNA in v1NST was significantly higher than that in KF. The distribution of BDA marker terminals, NK1R marker terminals, and GAD67 marker terminals was observed in the ventral part of the individual after microinjection of v1NST into the electrophoresis of the secondary and anterograde marker substance BDA. The results showed that NK1R was detected in the brain, and BDA was detected in the immune response of GAD67. The above results show that there is a part of GABA activation and inhibition in the pre-BotC pathway.

项目成果

Insular cortical and amygdaloid fibers are in contact with posterolateral hypothalamic neurons projecting to the nucleus of the solitary tract in the rat

• DOI: 10.1016/j.brainres.2005.11.040
• 发表时间: 2006-01
• 期刊: Brain Research
• 影响因子: 2.9
• 作者: T. Tsumori;S. Yokota;Toshiro Kishi;Yi Qin;T. Oka;Y. Yasui

Organization of projections from the nucleus of the solitary tract to the neurokinin-1 receptor-immunoreactive neurons in the pre-Botzinger complex of the rat

大鼠前 Botzinger 复合体中从孤束核到神经激肽-1 受体免疫反应性神经元的投射组织

• 发表时间: 2004
• 期刊: Anatomical Science International 79
• 作者: Tsumori T;Yokota S;Kishi T;Qin Y;Oka T;Yasui Y.;S.Yokota
• 通讯作者: S.Yokota