ラット脊髄後角における痛覚情報伝達に及ぼすプロテアーゼ受容体活性化の効果

蛋白酶受体激活对大鼠脊髓背角疼痛信息传递的影响

• 批准号: 16700340
• 负责人: 藤田 亜美
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: Saga University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16700340/
• 关键词: excitatory transmission; nociception; peptide; proteinase-activated receptor; rat; spinal dorsal horn; substantia gelatinosa; whole-cell patch-clamp technique; rexcitatory transmission

本研究の目的は、脊髄膠様質における痛覚情報伝達の制御に対してproteinase-activated receptor(PAR)がどのように作用しているのかをシナプスレベルで解明することである。そのためラット脊髄膠様質ニューロンに対してホールセル・パッチクランプ法を適用し、一連の実験を行なった。本年度は昨年度のPAR-1とPAR-2の研究に引き続いて、PAR-3とPAR-4のアゴニストペプチド(PAR-3:TFRGAP、PAR-4:GYPGQV)の作用を検討した。まず、各ペプチドの1μMを灌流投与し、保持膜電流に対するこれらの活性化の作用について調べた。その結果、この膜電流に変化がみられなかったことから、PAR-3とPAR-4の活性化はシナプス後細胞には直接影響しないことが分かった。次に、自発性興奮性シナプス後電流(sEPSC)に対するPAR-3とPAR-4の活性化効果を調べたところ、いずれもsEPSCの発生頻度および振幅に影響を及ぼさなかった。このことより、PAR-3とPAR-4の活性化はシナプス前神経終末からのグルタミン酸放出には影響しないことが示唆された。また、昨年の研究でPAR-1アゴニストペプチド(SFLLRN,1μM)の灌流投与によってsEPSCの発生頻度が増加することが明らかとなったので、この促進作用に対するTTXの効果について検討した。その結果、sEpscの発生頻度の増加はTTX存在下で影響を受けなかったことから、その作用はニューロンの膜興奮性増加によるものではなくPAR-1活性化の直接作用によるもので、シナプス前神経終末からのグルタミン酸放出促進によることが判明した。以上の結果より、脊髄膠様質においてPAR4-1性化が痛覚情報伝達の制御に関与していることが明らかとなった。

这项研究的目的是在突触水平上阐明蛋白酶激活的受体（PARS）如何作用于脊柱神经胶质瘤物质中疼痛感觉传导的调节。因此，将整个细胞贴片夹方法应用于大鼠脊柱胶质细胞神经元，并进行了一系列实验。在上一个财政年度对PAR-1和PAR-2的研究之后，我们研究了PAR-3和PAR-4的激动剂肽的影响（Par-3：TFRGAP，PAR-4：GYPGQV）。首先，对每种肽的1μM进行灌注，并研究了这些激活对保留膜电流的影响。结果，未观察到膜电流的变化，发现PAR-3和PAR-4的激活对突触后细胞没有直接影响。接下来，我们研究了Par-3和Par-4对自发兴奋性突触后电流（SEPSC）的激活作用，并且它们都不影响SEPSC的频率和振幅。这表明PAR-3和PAR-4的激活不会影响突触前神经末端的谷氨酸释放。此外，去年的研究表明，PAR-1激动剂肽（SFLLRN，1μM）的灌注施用增加了SEPC发生的频率，因此检查了TTX对这种促销效应的影响。结果，在TTX存在的情况下，SEPC发育频率的增加不影响，其作用不是由于神经元中的膜兴奋性的增加，而是由于PAR-1的激活而直接影响，而是由于促进前神经前神经终端促进谷氨酸释放。以上结果表明，par4-1转化与脊柱神经胶质组织组织中疼痛信号的调节有关。

项目成果

Tramadol produces outward currents by activating μ-opioid receptors in adult rat substantia gelatinosa neurons.

曲马多通过激活成年大鼠胶质神经元中的 μ-阿片受体来产生外向电流。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Br. J. Pharmacol. 145・5
• 作者: A.Koga;et al.
• 通讯作者: et al.

AM404 enhances the spontaneous Release of L-glutamate in a manner sensitive to capsazepine in adult rat substantia gelatinosa neurons.

AM404 以对成年大鼠胶质神经元中的辣椒西平敏感的方式增强 L-谷氨酸的自发释放。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Brain Res. 1018・2
• 作者: H.-Y.Yue;et al.
• 通讯作者: et al.

Enhancement of the releases of GABA and glycine during ischemia in rat spinal dorsal horn.

大鼠脊髓背角缺血期间 GABA 和甘氨酸释放的增强。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Biochem.Biophys.Res.Commun. 316・2
• 作者: Y.Kawasaki;et al.
• 通讯作者: et al.

Regulation by equilibrative nucleoside transporter of adenosine outward currents in adult rat spinal dorsal horn neurons.

成年大鼠脊髓背角神经元中腺苷外向电流的平衡核苷转运蛋白的调节。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Brain Res.Bull 64・1
• 作者: T.Liu;et al.
• 通讯作者: et al.

Adenosine inhibits GABAergic and glycinergic transmission in adult rat substantia gelatinosa neurons.

• DOI: 10.1152/jn.00291.2004
• 发表时间: 2004-11
• 期刊: Journal of neurophysiology
• 影响因子: 2.5
• 作者: Kun Yang;T. Fujita;E. Kumamoto