魚油摂取による成熟型SREBP-1c生成抑制機序の解明

阐明鱼油摄入抑制成熟 SREBP-1c 产生的机制

• 批准号: 16700536
• 负责人: 仲谷 照代
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: National Institute of Health and Nutrition
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16700536/
• 关键词: 魚油; SREBP-1c

SREBP(sterol regulatory element binding protein)は脂肪酸合成酵素の発現量を制御している転写因子である。魚油摂取による脂肪合成抑制メカニズムに、成熟型SREBP-1c量の減少が関与している。これまでの申請者らの研究により、魚油をマウスに摂取させると肝臓での成熟型SREBP-1c量が顕著に減少すること、またその成熟型SREBP-1c量減少作用には、摂取魚油量の違いにより2つの段階において調節されていることを見い出している(J.Lipid Res.2003)。本研究では特に魚油少摂取によるSREBP-1c量減少メカニズムに焦点をおき解明する。魚油摂取少量の場合(10〜20en%)、成熟型SREBP-1c蛋白量の低下はSREBP-1c mRNA量の有意な変化なしに引き起こされることから、未成熟型SREBP-1c蛋白の成熟型への移行(プロセシング)を抑制することにより成熟型SREBP-1c量を低下させていると考えられる。SREBP-2の場合はSCAP, S1Pというタンパク質の結合がプロセシング機構に必要であるが、魚油摂取においてSCAP, S1P遺伝子発現量の変化がみられなかったことから、これら以外のものの関与が考えられた。本研究は、魚油摂取によるSREBP-1蛋白のプロセシング抑制メカニズムを明らかにするため、酵母two-hybrid法により未成熟SERBP-1cに結合するタンパク質を同定することを試みた。研究方法:未成熟型SREBP-1cをN末、中央、C末部分と3ケ所に分け、それぞれのおとり遺伝子をGAL4DNA結合ドメイン融合体として発現させ、これらに結合するタンパク質を酵母two-hybrid法により、human liver cDNA library (GAL4活性化ドメインとの融合タンパク)からスクリーニングした(1次スクリーニング)。研究結果:未成熟型SREBP-1cをおとりとした酵母two-hybrid法により、SREBP-1c結合タンパク質の1次スクリーニングを行い、有望な遺伝子7個見出した。これらのタンパクが魚油によるSREBP-1蛋白のプロセシング抑制メカニズムに関与している可能性がある。

SREBP(sterol regulatory element binding protein) regulates the production of fatty acid synthase. Fish oil is associated with fat synthesis inhibition, and with the reduction of mature SREBP-1c levels. The applicant's research indicates that the amount of mature SREBP-1c in the liver is reduced by the amount of fish oil extracted from the liver (J. Lipid Res. 2003). This study focuses on the reduction of SREBP-1c in fish oil production. When fish oil is used in small amounts (10 ~ 20en%), the decrease in mature SREBP-1c protein level is caused by the intentional change in SREBP-1c mRNA level, and the decrease in mature SREBP-1c protein level is caused by the inhibition of mature SREBP-1c protein migration. SCAP, S1P, S1P, S1P In this study, fish oil was used to extract SREBP-1 protein from the protein and inhibit its binding to immature SERBP-1c by yeast two-hybrid method. Research methods: immature SREBP-1c N terminal, central, C terminal part and 3 terminal parts of the separation, the separation of GAL4 DNA binding fusion, the development of GAL4 DNA binding fusion, the separation of GAL4 DNA binding, the separation of GAL4 DNA binding fusion, the separation of GAL4 DNA binding, the separation of GAL4 DNA fusion, the separation of GAL4 DNA binding, the separation of GAL4 DNA binding, the separation of GAL4 DNA fusion, the separation of GAL4 DNA binding, the separation of G The results showed that 7 immature SREBP-1c strains were detected by yeast two-hybrid method, SREBP-1c was combined with SREBP-1c, and 7 mature SREBP-1c strains were detected. The possibility of SREBP-1 protein expression in fish oil is discussed.