骨髄・骨細胞MEF2Cの閉経後骨粗鬆症誘導における役割

骨髓/骨细胞 MEF2C 在绝经后骨质疏松诱导中的作用

• 批准号: 22K09366
• 负责人: 仲谷 照代
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Mukogawa Women's University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K09366/
• 关键词: MEF2C; RankL; 閉経後骨粗鬆症; 骨髄; 骨細胞

本研究では、閉経に伴うエストロゲン低下が骨細胞または骨髄MEF2C増加を引き起こすことにより、Rankl発現が増加し、破骨細胞の活性化、また骨髄内脂肪、骨形成バランスに影響を与え、骨粗鬆症へと導くという研究仮説を検証するため、マウス骨髄由来間葉系幹細胞(ST2)からの脂肪細胞分化誘導系を用いた機能解析、また骨細胞特異的Mef2cノックアウトマウスの卵巣を摘出することにより閉経後骨粗鬆症モデルとなるマウス(OVX)を用いた機能解析、骨表現型の解析を行う。１．骨髄MEF2Cが破骨、脂肪、骨芽細胞分化に寄与しているか、C/EBPsがMEF2C発現に関与しているか明らかにする。骨髄中には脂肪、骨芽、破骨細胞などの前駆細胞が存在するが、骨髄内脂肪細胞分化の初期段階に必要な転写因子、C/EBPsを介してRANKLの発現が誘導され、脂肪細胞分化と破骨細胞分化のクロストークが示唆された。加齢に伴い骨髄内で脂肪細胞が増加し骨形成が減少する。ST2細胞の脂肪細胞分化誘導系を用いた機能解析：培養条件の検討を行った。具体的には、pcDNA3-Mef2cを細胞にトランスフェクションをし、IBMX, Dex.等の刺激条件下でtime-courseやdose-dependentなどにより培養条件設定の検討。pcDNA3.1mouseC/EBP beta とpcDNA3.Ｃ/EBP deltaプラスミドを購入し、トランスフェクションの準備。２．骨細胞MEF2C増加が閉経後骨粗鬆症に関与しているか否か明らかにする。骨細胞特異的Mef2cノックアウトマウス（骨細胞Mef2c KOマウス）の作製：分担者所属大学での動物実験計画承認を得ることが出来、Jackson labから凍結胚（Mef2c〈tmJjs〉/J_Embryo）が納品され、固体化を行い、Prx1CreとのKOマウスの交配を開始。

In this study, osteoclast activation, osteoclastogenesis, osteoclastogenesis, oste Bone cell-specific Mef2c is used for functional analysis and bone phenotype analysis of osteodystrophy (OVX) 1. MEF2C is associated with osteoclast, adipocyte and osteoblast differentiation, and C/EBPs are associated with MEF2C development. The expression of RANKL is mediated by the expression of essential factors and C/EBPs in the early stages of adipocyte differentiation in bone marrow, and the expression of adipocyte differentiation and osteoclast differentiation is mediated by the expression of osteoclast differentiation. Increased fat cells and decreased bone formation in the bone marrow. Function analysis of adipocyte differentiation induction system of ST2 cells: culture conditions and development. Specific pcDNA3-Mef2c cell culture conditions under time-course and dose-dependent conditions such as IBMX, Dex. pcDNA3.1mouseC/EBP beta and pcDNA3.C/EBP delta options are available for purchase and preparation. 2. Increased MEF2C in osteocytes is associated with post-menopausal osteoporosis. Production of osteocyte-specific Mef2c <tmJjs>(osteocyte Mef2c KO <tmJs): animal development program of the university to which the participant belongs recognizes that the frozen embryos (Mef2c <tmJjs>/J_Embryo) are accepted, solidified, and mated with Prx1Cre <tmJs>.