前脳基底部アセチルコリン神経とLhxファミリー-分子メカニズムの解明とその応用-

基底前脑乙酰胆碱神经和Lhx家族-分子机制及其应用的阐明-

• 批准号: 17790143
• 负责人: 眞部 孝幸
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research (2007)Nara Medical University (2005-2006)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790143/
• 关键词: L3; Lhx8; 神経分化; アセチルコリン; ES; GABA

L3/Lhx8 KOマウスへESを移植し、アセチルコリン神経への分化誘導を促し、アセチルコリン神経の再生を大きな目的とした。本年度は、昨年の結果を更に詳細に検討するために、ES細胞の分化条件を細胞間相互作用に焦点を当てて確立した。まず、ES細胞を浮遊培地にてニューロスフェアーに分化させ、ニューロスフェアーのまま(細胞間接着をたもったまま)レチノイン酸を用いて神経系への分化を試みた。このES細胞株は、OCT3/4を恒常的に発現する細胞株で、Lif存在下で増殖能を有し、Lif非存在下では神経系へ分化しやすい特徴を持つ。検討の結果、神経系への分化条件を確立し、以下の実験を行った。まず、上記分化条件におけるL3/Lhx8ノックダウンの影響を検討した。その結果、L3/Lhx8のノックダウンは、ニューロスフェアーの状態であっても、著明にアセチルコリン神経への分化を抑制した。しかしながら、全神経細胞、アストロサイト、GABA作動性神経への影響は認められなかった。次に、L3/Lhx8を一過性に強制発現させると、アセチルコリン神経分化が著明に増強された。このときにも、全神経細胞、アストロサイト、GABA作動性神経数は変化しなかった。更に、L3/Lhx8ノックダウンによるアセチルコリン神経分化の抑制が、L3/Lhx8の強制発現によりレスキューされるか否かについて検討を行った。その結果、L3/Lhx8を強制発現させると、アセチルコリン神経分化が回復することが明らかとなった。これらの結果をin vivoに応用させ、アセチルコリン神経分化をコントロールすることによって、アルツハイマー病をはじめとするコリン作動性神経変性疾患の回復に利用できる可能性が示唆された。

L3/Lhx8 KO/ES transplantation, induction of differentiation, regeneration This year's results show that the differentiation conditions of ES cells have been established. The cells were cultured in vitro, and the cells were cultured in vitro. These ES cell lines showed consistent growth characteristics in OCT3/4 cells, and maintained growth characteristics in the presence and absence of Lif. The results of the study, the conditions for differentiation of the nervous system, and the implementation of the following are established. L3/Lhx8 is the most important factor affecting the quality of the products. As a result, L3/Lhx8 has been shown to inhibit the differentiation of the brain. The effects of GABA on the whole nervous system, the nervous system, and the brain are recognized. L3/Lhx8 is a transient stress event, and its neurodifferentiation is enhanced. The number of cells in the brain, the number of cells in the brain. In addition, L3/Lhx8 can be used to inhibit the differentiation of neurons, and L3/Lhx8 can be used to inhibit the occurrence of stress. As a result, L3/Lhx8 is forced to appear and recover. The results of this study indicate the possibility of recovery from active neurological disorders in vivo.

项目成果

L3/Lhx8 is a pivotal factor for cholinergic differentiation of murine embryonic stem cells

• DOI: 10.1038/sj.cdd.4402106
• 发表时间: 2007-06-01
• 期刊: CELL DEATH AND DIFFERENTIATION
• 影响因子: 12.4
• 作者: Manabe, T.;Tatsumi, K.;Wanaka, A.
• 通讯作者: Wanaka, A.

DACS, novel matrix structure composed of chondroitin sulfate proteoglycan in the brain

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2007.10.040
• 发表时间: 2007-12-14
• 期刊: BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS
• 影响因子: 3.1
• 作者: Hayashi, Noriko;Tatsumi, Kouko;Wanaka, Akio
• 通讯作者: Wanaka, Akio

Knockdown of the L3/Lhx8 gene suppresses cholinergic differentiation of murine embryonic stem cell-derived spheres

• DOI: 10.1016/j.ijdevneu.2007.11.004
• 发表时间: 2008-04
• 期刊: International Journal of Developmental Neuroscience
• 影响因子: 1.8
• 作者: T. Manabe;K. Tatsumi;M. Inoue;H. Matsuyoshi;M. Makinodan;Takahira Yamauchi;E. Makinodan;Shohei Yokoyama-Sh

A novel role for Fyn: change in sphere formation ability in murine embryonic stem cells

Fyn 的新作用：改变小鼠胚胎干细胞球体形成能力

• 发表时间: 2007
• 期刊: Neuroscience. 147
• 作者: Makinodan E;Manabe T;Makinodan M;Yamauchi T;Matsuyoshi H;Sakumura R;Tatsumi K;Wanaka A.
• 通讯作者: Wanaka A.

L3/Lhx8 is involved in the determination of cholinergic or GABAergic cell fate

• DOI: 10.1111/j.1471-4159.2005.03261.x
• 发表时间: 2005-08-01
• 期刊: JOURNAL OF NEUROCHEMISTRY
• 影响因子: 4.7
• 作者: Manabe, T;Tatsumi, K;Wanaka, A
• 通讯作者: Wanaka, A