アポトーシスおよび細胞骨格制御におけるアクチン結合タンパクNd1の機能解析

肌动蛋白结合蛋白Nd1在细胞凋亡和细胞骨架调控中的功能分析

• 批准号: 17790203
• 负责人: 藤村 理紗
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790203/
• 关键词: ND1; アクチン結合たんぱく; 癌転移; ケルチファミリー; 細胞接着; トランスジェニックマウス; ノックアウトマウス; β-catenin; Nd1-L; アクチン結合蛋白; アポトーシス; 細胞骨格

Nd1-L-Tgマウスは、作製した3系統すべてにおいて約1年後にリンパ腫、肝細胞がん、その他上皮系細胞などにがんが高率に発生した。BTB-Kelchファミリーの遺伝子が発がんにおいて重要な役割があるという報告もあることから、Nd1-Lと発がんおよびがん浸潤、転移に関して解析をすすめたところ以下の結果が得られた。(1)Nd1-L-Tgマウスにおいて高率にがんが発生する。また、Nd1-L-Tgマウスの組織においてβ-cateninの量が増加していた。さらに多くの細胞では核内活性型β-cateninが認められた。(2)がん細胞の転移、浸潤、悪性度におけるNd1-Lの関与について、マウス大腸がん細胞株Colon26とマウスメラノーマ細胞株B16を用いて検討を行った。Colon26をBALB/cマウスに静脈注射し、肺転移した結節と、親細胞におけるNd1-Lの発現についてウェスタンブロット法により調べたところ、肺転移結節ではNd1-Lタンパクの発現が約50%まで減少していた。(3)Nd1-Lを強発現したColon26とB16のクローンを、マウスの尾静脈に接種し肺転移の結節の数について調べたところ、両者ともに転移結節数がコントロールの約20%に減少した。(4)RNAi法によりNd1-Lの発現抑制したクローンを作製し、マウスの尾静脈に接種し、肺転移の結節の数について調べた。発現抑制したクローンはColon26とB16両者において、コントロールと比べ転移による結節数が約1.5倍増加していた。以上の結果より、Nd1-Lの過剰発現により局所での細胞腫瘍化をきたすが、腫瘍の転移や浸潤は抑制され、逆にその発現の減少により転移浸潤を促進することから、Nd1-Lの発現量がアポトーシスや細胞接着、発がん、がん浸潤転移を制御していると考えられた。

在所有三种菌株中，大约一年后，淋巴瘤，肝细胞癌和其他上皮细胞的癌症均以高率发生。还有报道说，BTB-Kelch家族基因在癌变中具有重要作用，分析ND1-L，癌变，癌症侵袭和转移给出了以下结果。 （1）ND1-L-TG小鼠的癌症发生率高。此外，在ND1-L-TG小鼠的组织中，β-catenin量增加。另外，在许多细胞中观察到核活性β-catenin。 （2）使用小鼠结肠癌细胞系结肠26和小鼠黑色素瘤细胞系B16研究了ND1-L参与癌细胞转移，侵袭和恶性肿瘤。将结肠26静脉注射到BALB/c小鼠中，并通过蛋白质印迹检查ND1-L的表达和肺部转移性细胞的表达，并将ND1-L蛋白在肺转移结节中的表达减少到约50％。 （3）当通过接种具有强ND1-L表达的小鼠的尾部静脉来检查肺转移的点数时，两种情况下，转移的点头数量均降低至对照的20％。 （4）通过接种到小鼠的尾静脉的RNAi方法制备具有抑制ND1-L表达的克隆，并检查了肺转移中的结节数量。与对照相比，在抑制克隆中，COLON26和B16的结节数量增加了约1.5倍。从以上结果来看，人们认为ND1-L的过表达会导致局部细胞肿瘤发生，但是肿瘤转移和侵袭被抑制，相反，通过降低其表达，转移性侵袭，因此促进了ND1-L控制的表达水平，细胞粘附，癌变，癌变，癌症发生，癌症发生。

项目成果

Expression of the Ndl gene is down-regulated by doxorubicin at post-transcriptional level.

Ndl 基因的表达在转录后水平被多柔比星下调。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Int. J. Mol. Med. 18
• 作者: Takamori;Y.;et al.
• 通讯作者: et al.

Identification of the consensus DNA sequence for Nczf-binding.

鉴定 Nczf 结合的共有 DNA 序列。

• 发表时间: 2007
• 期刊: DNA and Cell Biol. (In press)
• 作者: Kitahashi;M.;et al.
• 通讯作者: et al.

Overexpression of Ndl, a novel Kelch family protein, in the heart of transgenic mice protects against doxorubicin-induced cardiomyopathy.

Ndl（一种新型 Kelch 家族蛋白）在转基因小鼠心脏中的过度表达可预防阿霉素诱导的心肌病。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Transgenic Research 15
• 作者: Matsudo;Y.;et al.
• 通讯作者: et al.

Overexpression of Nd1-s, a variant form of new kelch family protein, perturbs the cell cycle progression of fibroblasts.

• DOI: 10.1089/dna.2005.24.30
• 发表时间: 2005-01
• 期刊: DNA and cell biology
• 影响因子: 3.1
• 作者: A. Inoue;Myengmo Kang;L. Fujimura;Yasuyuki Takamori;K. Sasagawa;H. Itoh;T. Tokuhisa;M. Hatano