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コレラ毒素Bサブユニットの粘膜アジュバントのメカニズムと組織安全性に関する研究

霍乱毒素B亚基粘膜佐剂作用机制及组织安全性研究

基本信息

批准号：
17790290
负责人：
井坂雅徳
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Nagoya City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

コレラ毒素Bサブユニット(rCTB)の粘膜投与後の中枢神経系への影響の詳細な報告はまだされていない事から、脳、鼻腔等の組織切片の免疫染色法、HE染色法等により神経組織の影響を調査した。実験としてはコレラ毒素(CT)、rCTB経鼻投与マウスの脳、嗅球の凍結切片作製とヘマトキシリンヒオジシHE染色、抗CTB抗体による免疫染色による脳組織への移行性と組織への影響、ヒトで報告された顔面神経麻痺(ベル麻痺)から推測し、ベル麻痺の原因ウイルスであると言われている単純ヘルペスウイルス1型(HSV1)感染マウスモデルの作製、HSV1感染マウスへCT、rCTB経鼻投与後の顔面神経麻痺の観察、顔面神経麻痺マウスの組織観察とNested PCR法によるHSV特異的DNA断片測定を行った。コレラ毒素(CT)、rCTB経鼻投与マウスの脳、嗅球の脳組織への移行性と組織への影響を観察した結果、HE染色で検討するとrCTB経鼻投与マウスの嗅球は、組織的変化、炎症性細胞の浸潤等は全く見られなかった。一方CTの場合、上皮の剥離が著明で、糸球体構造も不規則な形態を取り、切片作製でも組織自体が固定しづらく不安定な状態であった。抗CTB抗体による免疫染色では、両者共に経鼻投与を行うと、嗅球の糸球体、僧坊細胞層にまで移行する事が示された。HSV1感染マウスへCT、CTB経鼻投与後の顔面神経麻痺の観察をすると、CT経鼻投与マウスの一部に、ウイルス投与側の目に麻痺を観察した。CTB, PBSコントロールでは観察されなかった。Nested PCRによる特異的DNA断片は、CT経鼻投与マウスの一部で測定された。以上の結果はウイルス投与マウスで観察され、ウイルス非投与群では観察されなかった事から、ヒトに経鼻投与されたワクチンに混入した大腸菌易熱性毒素による影響でベル麻痺が発症したと推測される。

A detailed report on the effects of rCTB on the central nervous system after mucosal administration. Immunostaining and HE staining of tissue sections from the nasal cavity, nasal cavity, etc. were used to investigate the effects on the nervous system. In fact, it is speculated that the migration of tissues and the effects of tissue migration due to the nasal administration of Corelin toxin (CT), rCTB, frozen sections of the olfactory bulb and HE staining, immunostaining for anti-CTB antibodies, and facial paralysis (Berle paralysis) reported today, The cause of facial paralysis is described in detail in the following paragraphs: HSV 1 infection, HSV1 infection, HSV 2 infection, HSV 3 infection, HSV1 infection, HSV1 infection, HSV 2 infection, HSV 1 infection, CT, rCTB nasal administration and its presence, migration of olfactory bulb tissue and tissue effects, HE staining, rCTB nasal administration and its olfactory bulb tissue, tissue changes, inflammatory cell infiltration, etc. were all observed. In CT, epithelial exfoliation, irregular morphology, slice preparation, and tissue self-fixation are not stable. Anti-CTB antibody immunostaining was used to detect the migration of the olfactory bulb and the retina. HSV-1 infection: CT, CTB, nasal administration and observation of facial paralysis, CT, nasal administration and observation of facial paralysis CTB, PBS, PBS. Nested PCR was used to detect a specific DNA fragment. The above results show that the infection rate of E. coli is higher than that of E. coli.