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コレラ毒素Bサブユニットの粘膜アジュバントのメカニズムと組織安全性に関する研究

霍乱毒素B亚基粘膜佐剂作用机制及组织安全性研究

基本信息

批准号：
17790290
负责人：
井坂雅徳
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Nagoya City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

コレラ毒素Bサブユニット(rCTB)の粘膜投与後の中枢神経系への影響の詳細な報告はまだされていない事から、脳、鼻腔等の組織切片の免疫染色法、HE染色法等により神経組織の影響を調査した。実験としてはコレラ毒素(CT)、rCTB経鼻投与マウスの脳、嗅球の凍結切片作製とヘマトキシリンヒオジシHE染色、抗CTB抗体による免疫染色による脳組織への移行性と組織への影響、ヒトで報告された顔面神経麻痺(ベル麻痺)から推測し、ベル麻痺の原因ウイルスであると言われている単純ヘルペスウイルス1型(HSV1)感染マウスモデルの作製、HSV1感染マウスへCT、rCTB経鼻投与後の顔面神経麻痺の観察、顔面神経麻痺マウスの組織観察とNested PCR法によるHSV特異的DNA断片測定を行った。コレラ毒素(CT)、rCTB経鼻投与マウスの脳、嗅球の脳組織への移行性と組織への影響を観察した結果、HE染色で検討するとrCTB経鼻投与マウスの嗅球は、組織的変化、炎症性細胞の浸潤等は全く見られなかった。一方CTの場合、上皮の剥離が著明で、糸球体構造も不規則な形態を取り、切片作製でも組織自体が固定しづらく不安定な状態であった。抗CTB抗体による免疫染色では、両者共に経鼻投与を行うと、嗅球の糸球体、僧坊細胞層にまで移行する事が示された。HSV1感染マウスへCT、CTB経鼻投与後の顔面神経麻痺の観察をすると、CT経鼻投与マウスの一部に、ウイルス投与側の目に麻痺を観察した。CTB, PBSコントロールでは観察されなかった。Nested PCRによる特異的DNA断片は、CT経鼻投与マウスの一部で測定された。以上の結果はウイルス投与マウスで観察され、ウイルス非投与群では観察されなかった事から、ヒトに経鼻投与されたワクチンに混入した大腸菌易熱性毒素による影響でベル麻痺が発症したと推測される。

The mucous membrane of the central nervous system (rCTB) was injected into the central nervous system. The report showed that the tissue sections of the nasal cavity and the nasal cavity were stained by immunostaining and HE staining. CT, rCTB intranasal injection, olfactory bulb, olfactory bulb sections were stained with HE, anti-CTB antibody, immuno-staining, tissue transfer test, tissue transfer test and report. The cause of the disease, the cause, the cause, The results of CT, rCTB intranasal intranasal injection, olfactory bulb tissue migration, HE staining, tissue histology, inflammatory cell infiltration and so on. One side of the CT is closed, the epithelium is exfoliated, the spheroid is made, and the tissue is self-fixed, the tissue is not stable, and the tissue is unstable. The anti-CTB antibody was stained by immuno-staining, and the nasal cavity and the olfactory bulb, the olfactory bulb, the monk and the monk were detected by immunostaining. HSV1 infection was caused by nasal injection (CT), nasal injection (CTB), nasal cavity (nose) and back (back), CT (nasal cavity and nose), eye (eye), nose and eye. CTB, PBS, I don't know if you want to see what's going on. The DNA fragments, CT intranasal drops and nasal drops of Nested PCR were tested one by one. The results of the above results show that there is no significant difference between the two groups. In the above results, the results of the above results show that there is no significant difference between the two groups. The results of the above results show that the results of the above results are as follows: the results of the above results show that there is no significant difference between the two groups.