Tリンパ球の分化・選択・アポトーシス制御におけるIANファミリーの役割

IAN家族在调节T淋巴细胞分化、选择和凋亡中的作用

• 批准号: 17790323
• 负责人: 新田 剛
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790323/
• 关键词: Tリンパ球分化; 胸腺; 正負の選択; アポーシス; GTP結合タンパク質; IANファミリー; Bcl-2ファミリー

機能未知のGTP結合タンパクであるIANファミリー分子群に着目し、Tリンパ球の分化と生存制御におけるそれらの役割について、解析を行った。(1)IANファミリー分子とBcl-2ファミリー分子間の相互作用GFP融合タンパク質と共焦点レーザー顕微鏡を用いた観察、および細胞抽出物の分画法により、IAN4とIAN5がミトコンドリアおよび小胞体に局在することを明らかにした。兔疫共沈降法を用いて、Tリンパ球におけるIAN4、IAN5とBcl-2ファミリー分子の相互作用を明らかにした。また、IAN5遺伝子のノックダウンによるTリンパ球細胞のアポトーシスの亢進が、Bcl-xLの過剰発現によって抑制されることから、IANファミリーとBcl-2ファミリーの間に機能相関があることが示唆された。(2)Tリンパ球分化におけるIANファミリー分子の役割種々のTCR Tgマウス由来の胸腺細胞を用いてTリンパ球の分化・選択に限局した解析を行い、IAN4が正の選択に必須の役割を果たすこと、およびIAN5がDN4細胞からDP細胞への分化に重要であることを見出した。さらに、shRNA発現レンチウイルスベクターによる遺伝子ノックダウンと骨髓キメラマウスの作製によって、造血系細胞の分化への影響を個体レベルで解析中である。(3)ノックアウト(KO)マウスの作製による個体レベルの解析IAN4-KOマウスの作製を行った。IAN4遺伝子座は繰り返し配列に富むためターゲティングベクターの作製や相同組み換え体ES細胞の選別が難航したが、既に複数のES細胞クローンを得ており、現在キメラマウスを作製中である。同時に、8種類のIANファミリー遺伝子全てを欠失させたKOマウスを作製するため、ターゲティングベクターの構築を進めている。(1)(2)の成果をPLoS Biology誌(2006,in press)に発表した。

Function unknown の GTP combination made タ ン パ ク で あ る IAN フ ァ ミ リ に the mesh し ー molecular group, T リ ン パ ball の differentiation と survival suppression に お け る そ れ ら の service cut に つ い analytical line を っ て, た. (1) IAN フ ァ ミ リ ー molecular と Bcl - 2 フ ァ ミ リ ー intermolecular interaction の GFP fusion タ ン パ ク qualitative と total focus レ ー ザ ー 顕 micromirror を with い た 観 examine, お よ び cell extract の points illustration に よ り, IAN4 と IAN5 が ミ ト コ ン ド リ ア お よ び small cell body に bureau in す る こ と を Ming ら か に し た. Rabbit plague を total settlement method with い て, T リ ン パ ball に お け る IAN4, IAN5 と Bcl - 2 フ ァ ミ リ ー molecular の interaction を Ming ら か に し た. ま た, IAN5 but 伝 の ノ ッ ク ダ ウ ン に よ る T リ ン パ ball cell の ア ポ ト ー シ ス の hyperthyroidism が, Bcl - xL の turning 発 now に よ っ て inhibit さ れ る こ と か ら, IAN フ ァ ミ リ ー と Bcl - 2 フ ァ ミ リ ー の に function between phase masato が あ る こ と が in stopping さ れ た. (2)Tリ <s:1> パ パ spherosphere differentiation におけるIANファ リ リ <s:1> molecular <s:1> subdivision seed 々 <s:1> TCR Tg マ ウ ス origin の thymus cells を using い て T リ ン パ ball の differentiation, sentaku に limit bureau し た parsing を い, IAN4 が is の sentaku に must cut を の service fruit た す こ と, お よ び IAN5 が DN4 cells か ら DP cells へ の differentiation に important で あ る こ と を shows し た. さ ら に, shRNA 発 now レ ン チ ウ イ ル ス ベ ク タ ー に よ る posthumous son 伝 ノ ッ ク ダ ウ ン と bone marrow キ メ ラ マ ウ ス の cropping に よ っ て, hematopoietic cells の へ の affect individual を レ ベ ル で parsing で あ る. (3)ノッ ノッ アウト アウト(KO) ウス ウス による individual レベ レベ explanation IAN4-KO ウス ウス を を line った. IAN4 heritage 伝 stroma は Qiao り return し match column に rich む た め タ ー ゲ テ ィ ン グ ベ ク タ ー の cropping や み in same group え body の ES cells seeding が difficult navigation し た が, both に plural の ES cells ク ロ ー ン を have て お り, now キ メ ラ マ ウ ス を cropping systems in で あ る. に at the same time, 8 species の IAN フ ァ ミ リ ー heritage 伝 son all て を owe lost さ せ た KO マ ウ ス を cropping す る た め, タ ー ゲ テ ィ ン グ ベ ク タ ー の build を into め て い る. (1)(2) を results を published in PLoS Biology (2006,in press)に た.

项目成果

中枢性トレランスと自己免疫疾患

中枢耐受与自身免疫性疾病

• 发表时间: 2006
• 期刊: 日本臨床免疫学会会誌 29
• 作者: Shin-ichi Tsukumo;Nishimura Y. et al.;Okamoto T. et al.;Omatsu T. et al.;Yang C.et al.;Hamamoto I. et al.;Takeshi Nitta;新田 剛
• 通讯作者: 新田 剛

IAN family critically regulates survival and development of T lymphocytes.

Ian家族严格调节T淋巴细胞的生存和发展。

• DOI: 10.1371/journal.pbio.0040103
• 发表时间: 2006-04
• 期刊: PLOS BIOLOGY
• 影响因子: 9.8
• 作者: Nitta, Takeshi;Nasreen, Mariam;Seike, Takafumi;Goji, Atsushi;Ohigashi, Izumi;Miyazaki, Tadaaki;Ohta, Tsutomu;Kanno, Masamoto;Takahama, Yousuke
• 通讯作者: Takahama, Yousuke