Tリンパ球の分化・選択・アポトーシス制御におけるIANファミリーの役割

IAN家族在调节T淋巴细胞分化、选择和凋亡中的作用

• 批准号: 17790323
• 负责人: 新田 剛
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790323/
• 关键词: Tリンパ球分化; 胸腺; 正負の選択; アポーシス; GTP結合タンパク質; IANファミリー; Bcl-2ファミリー

機能未知のGTP結合タンパクであるIANファミリー分子群に着目し、Tリンパ球の分化と生存制御におけるそれらの役割について、解析を行った。(1)IANファミリー分子とBcl-2ファミリー分子間の相互作用GFP融合タンパク質と共焦点レーザー顕微鏡を用いた観察、および細胞抽出物の分画法により、IAN4とIAN5がミトコンドリアおよび小胞体に局在することを明らかにした。兔疫共沈降法を用いて、Tリンパ球におけるIAN4、IAN5とBcl-2ファミリー分子の相互作用を明らかにした。また、IAN5遺伝子のノックダウンによるTリンパ球細胞のアポトーシスの亢進が、Bcl-xLの過剰発現によって抑制されることから、IANファミリーとBcl-2ファミリーの間に機能相関があることが示唆された。(2)Tリンパ球分化におけるIANファミリー分子の役割種々のTCR Tgマウス由来の胸腺細胞を用いてTリンパ球の分化・選択に限局した解析を行い、IAN4が正の選択に必須の役割を果たすこと、およびIAN5がDN4細胞からDP細胞への分化に重要であることを見出した。さらに、shRNA発現レンチウイルスベクターによる遺伝子ノックダウンと骨髓キメラマウスの作製によって、造血系細胞の分化への影響を個体レベルで解析中である。(3)ノックアウト(KO)マウスの作製による個体レベルの解析IAN4-KOマウスの作製を行った。IAN4遺伝子座は繰り返し配列に富むためターゲティングベクターの作製や相同組み換え体ES細胞の選別が難航したが、既に複数のES細胞クローンを得ており、現在キメラマウスを作製中である。同時に、8種類のIANファミリー遺伝子全てを欠失させたKOマウスを作製するため、ターゲティングベクターの構築を進めている。(1)(2)の成果をPLoS Biology誌(2006,in press)に発表した。

The function of GTP binding is unknown, and the molecular group is targeted, differentiated, and controlled. (1) The molecular interactions between IAN and Bcl-2, GFP fusion protein, isozyme, confocal microscopy, and cell extract analysis, IAN4 and IAN5, and the molecular interactions between Bcl-2 and GFP fusion protein, isozyme and confocal microscopy. The molecular interactions between IAN4, IAN5 and Bcl-2 are clearly defined by the use of the anti-virus co-precipitation method. In addition, IAN5 gene expression and Bcl-2 gene expression are closely related to the function of Bcl-xL. (2)T The analysis of TCR Tg of thymocytes, the origin of TCR Tg, the differentiation and selection of thymocytes, the necessary differentiation of IAN4, and the important differentiation of DP cells in IAN5 and DN4 cells have been shown. In addition, shRNA development, gene expression, bone marrow differentiation, and the effects of hematopoietic differentiation on individual differentiation are discussed in detail. (3)IAN4-KO is the only one who can make it work. IAN4 gene sequence is in the process of selection of somatic ES cells of the same group. At the same time, 8 kinds of IAN, such as genetic diversity, diversity, diversity, (1) The results of (2) were published in Journal of PLoS Biology (2006,in press).

项目成果

中枢性トレランスと自己免疫疾患

中枢耐受与自身免疫性疾病

• 发表时间: 2006
• 期刊: 日本臨床免疫学会会誌 29
• 作者: Shin-ichi Tsukumo;Nishimura Y. et al.;Okamoto T. et al.;Omatsu T. et al.;Yang C.et al.;Hamamoto I. et al.;Takeshi Nitta;新田 剛
• 通讯作者: 新田 剛

IAN family critically regulates survival and development of T lymphocytes.

Ian家族严格调节T淋巴细胞的生存和发展。

• DOI: 10.1371/journal.pbio.0040103
• 发表时间: 2006-04
• 期刊: PLOS BIOLOGY
• 影响因子: 9.8
• 作者: Nitta, Takeshi;Nasreen, Mariam;Seike, Takafumi;Goji, Atsushi;Ohigashi, Izumi;Miyazaki, Tadaaki;Ohta, Tsutomu;Kanno, Masamoto;Takahama, Yousuke
• 通讯作者: Takahama, Yousuke