ヒ素によるアポトーシス誘導におけるDNaseIおよびIIの関与・役割の解明

阐明 DNase I 和 II 在砷诱导的细胞凋亡诱导中的参与和作用

• 批准号: 17790407
• 负责人: 藤原 純子
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Shimane University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790407/
• 关键词: DNase I; ヒ素; アポトーシス; 活性; 誘導; Hep3B; 断片化; アクチン; 糖鎖; 精製; 生化学的性状

高濃度のヒ素を含む飲料水による慢性中毒がアジアを中心とする国々で問題となっている。無機ヒ素の発癌作用が肺、皮膚などで報告されている。その一方で低濃度のヒ素は白血病細胞、神経芽細胞、大腸癌細胞においてアポトーシスを誘導することが知られ、副作用の少ない抗癌剤として注目を集めている。DNA断片化に関与するDeoxyribonuclease I(DNase I)が、ヒ素によるアポトーシス誘導に果たす役割は不明である。そこで本研究では、ヒ素のアポトーシス誘導過程でDNA断片化にどのような機構・機序でDNase Iが関与しているのかを分子レベルおよび細胞レベルで解明することを目的とした。最終年度にあたり、DNase Iをstableに発現する接着細胞系のHep3Bを用い、ヒ素化合物(亜ヒ酸・ヒ酸、モノメチルアルソン酸、ジメチルアルシン酸)によるアポトーシス誘導を行った。その結果、アポトーシスは亜ヒ酸>ヒ酸>モノメチルアルソン酸>ジメチルアルシン酸の順番で強く誘導されることがTUNEL assayにより明らかになった。またアポトーシス誘導により、DNase I活性はコントロール群と比較して有意差はみられなかった。さらに、ヒ素化合物がDNase Iの生化学的性状に及ぼす影響を調べた。その結果、DNase I活性はモノメチルアルソン酸によってのみ、活性が阻害されることが明らかになった。今後、浮遊細胞系のHL-60を用いたヒ素化合物によるアポトーシスの誘導を行いDNase I活性の変動について検討を行い、モノメチルアルソン酸がDNase Iの生化学的性状に及ぼす影響を調べる予定である。

High-grade chemicals contain raw materials, water, chronic poisoning, chronic poisoning and chronic poisoning. The effect of cancer on lung and dermatology reports is not sensitive to cancer. On the other hand, one side has low levels of leukemias, leukemic cells, germ cells, cancer cells, leukemia cells, cancer cells, cancer cells, cancer The DNA fragmentation system is similar to that of Deoxyribonuclease I (DNase I), and the results show that the operation is not clear. In this study, in the process of DNA fragmentation, the mechanism of DNase I and molecular analysis was used to understand the purpose of this study. The most recent stable of the year, DNase I stable, was followed by the introduction of cell line Hep3B compounds (acid, acid). The results show that the gt; acid-gt; acid-the gt; acid-the TUNEL assay acid is the most important thing in the system. Please tell me that the DNase I activity is much worse than that of the group. The chemical compounds DNase I, biochemical characters and phenotypic effects were studied. The results showed that the activity of DNase I was significantly higher than that of the control group (P < 0.05). The results of the test, the results of the test, the results of the results, the results In the future, the floating cell line HL-60 has been used to determine the activity of DNase I, the activity of DNase I, the characteristics of acid DNase I and the prediction of biochemical properties.

项目成果

Placental transfer of arsenic to fetus of Dall's porpoises (Phocoenoides dalli)

• DOI: 10.1016/j.marpolbul.2005.01.011
• 发表时间: 2005-01-01
• 期刊: MARINE POLLUTION BULLETIN
• 影响因子: 5.8
• 作者: Kubota, R;Kunito, T;Miyazaki, N
• 通讯作者: Miyazaki, N

Actin-inhibition and folding of vertebrate deoxyribonuclease I are affected by mutations at residues 67 and 114.

脊椎动物脱氧核糖核酸酶 I 的肌动蛋白抑制和折叠受到残基 67 和 114 处突变的影响。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Comparative Biochemistry and Physiology Part B 143・1
• 作者: Takeshita H;Fujihara J et al.;Fujihara J et al.;Fujihara J et al.;Fujihara J et al.
• 通讯作者: Fujihara J et al.

Single-step purification by lectin affinity and deglycosylation analysis of recombinant human and porcine deoxyribonucleases I expressed in COS-7 cells.

通过凝集素亲和力和去糖基化分析对 COS-7 细胞中表达的重组人和猪脱氧核糖核酸酶 I 进行一步纯化。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Biotechnology Letters 28・4
• 作者: Takeshita H;Fujihara J et al.;Fujihara J et al.
• 通讯作者: Fujihara J et al.

Single-step purification by lectin affinity and deglycosylation analysis of recombinant human and porcine deoxyribonuclease I expressed in COS-7 cells.

通过凝集素亲和力和去糖基化分析对 COS-7 细胞中表达的重组人和猪脱氧核糖核酸酶 I 进行一步纯化。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Biotechnology Letters (In press)
• 作者: Kubota T;Fujihara J et al.;Fujihara J et al.
• 通讯作者: Fujihara J et al.

Variation of interleukin 8 -251 A>T polymorphism in worldwide populations and intra-ethnic differences in Japanese populations.

• DOI: 10.1016/j.cca.2006.08.023
• 发表时间: 2007-02
• 期刊: Clinica chimica acta; international journal of clinical chemistry
• 作者: J. Fujihara;K. Shiwaku;T. Yasuda;I. Yuasa;H. Nishimukai;R. Iida;H. Takeshita