权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

NKT細胞および樹状細胞を介した食道癌に対する放射線併用免疫療法の開発

NKT细胞和树突状细胞介导的食管癌放射联合免疫治疗的进展

基本信息

批准号：
17790906
负责人：
阿久津泰典
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Chiba University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790906/
关键词：
樹状細胞放射線療法扁平上皮癌免疫療法食道癌

项目摘要

分子シャペロンgp96は,近年,抗原が抗原提示細胞に提示される際にきわめて重要な役割を担う分子であることが明らかになりつつある.今回われわれは,腫瘍由来のgp96の発現増強を放射線照射により誘導し,樹状細胞を用いた効率のよい免疫療法の開発を目指した「放射線併用樹状細胞腫瘍内局注」マウスモデルを作成しその効果を検討した.【方法】マウス扁平上皮癌細胞SCCVIIに2Gy/day x 1の放射線を照射し,細胞中のgp96の発現をウェスタンブロットにて,また,照射後の細胞の形態,細胞内のgp96の局在を蛍光染色にて検討した.また,in vitroにおけるgp96の細胞療法に及ぼす影響をcytotoxic assayにて検討した.in vivoの系ではマウスの大腿にlocal tumorとして,胸部皮下にはdistant tumorとしてSCCVII1x10<SUP>5</SUP>を皮下移植し,大腿のみに4Gy/day x 3の放射線照射とそれに続く樹状細胞の腫瘍内局注を行いlocal tumorおよびdistant tumorの抗腫瘍効果を検討した.さらに、腫瘍内に樹状細胞を直接注入した際の全身抗腫瘍効果を評価するため、TDLN(tumor drainage lymphnode)内の細胞障害性T細胞分画を検討した。【結果】gp96の発現は,照射後48時間で増強が見られた.また蛍光顕微鏡による観察では細胞の肥大化とともに細胞質内にgp96の強い発現増強が観察された.effector細胞をマウス脾臓細胞,抗原をSCCVIIのwhole tumor lysate,抗原提示細胞をDCとし,targetをSCCVIIとしたcytotoxic assayを行ったところgp96を加えた群では強い細胞傷害活性が観察された.また.in vivoの系において放射線照射およびDCの腫瘍内局注のマウスモデルでは、大腿のlocal tumorのみならず,遠隔の未治療distant tumorにも抗腫瘍効果が観察された.また、腫瘍内に樹状細胞を注射した際、TDLN内の細胞障害性T細胞分画の増加が観察され全身抗腫瘍効果が惹起されたことが確認された。【まとめ】腫瘍への放射線照射は,腫瘍のアポトーシス,あるいはネクローシスの誘導とそれによる腫瘍抗原の放出という利点だけではなく,gp96の発現増強を介したsystemicな免疫応答の増強が期待できる.一方で,樹状細胞の腫瘍内局注はcell deliveryの点できわめて有利であり,これらを組み合わせた放射線併用樹状細胞腫瘍内局注法はさらなる効率的な免疫治療になる可能性がある

Molecule gp96, in recent years, antigen to antigen prompt cell prompt, important service cut to carry molecule, such as light and light. In this paper, the development of immunotherapy with dendritic cells is described as "radiation and dendritic cell tumor injection." [Methods] SCCVII cells were irradiated with 2 Gy/day x 1 of radiation, and the expression of gp96 in the cells was examined by light staining. In vitro, gp96 cell therapy and its effects on cytotoxic assay were investigated.In vivo, it was found that SCCVII 1 x 10<SUP>5</SUP> was transplanted subcutaneously into the thigh, and the tumor was treated with radiation at 4 Gy/day x 3. To evaluate the effect of systemic anti-tumor therapy by direct injection of dendritic cells into tumor cells, and to investigate the cytotoxic T cells in TDLN(tumor drainage lymphocyte node). The results showed that gp96 appeared and its intensity increased 48 hours after irradiation. The expression of gp96 in the cytoplasm of cells was detected by microscope. The effector cells were detected by spleen cells. The antigen was SCCVII whole tumor lysate. The antigen was detected by SCCVII cytotoxic assay. In vivo, radiation exposure and DC tumor local injection, thigh local tumor, distant untreated tumor, anti-tumor effect were observed. In addition, the increase of cytoprotective T cell profile in TDLN was observed during tumor dendritic cell injection, and the effect of systemic anti-tumor was confirmed. Radiation exposure to tumor cells induced tumor antigen release and increased expression of gp96 mediated systemic immune response. A side, dendritic cells in the tumor local injection of cell delivery point, the combination of radiation and dendritic cells in the tumor local injection method, the possibility of anti-rate immunotherapy