破骨細胞分化過程における分泌タンパク質、膜タンパク質の網羅的解析

破骨细胞分化过程中分泌蛋白和膜蛋白的综合分析

• 批准号: 17791000
• 负责人: 北川 教弘
• 金额: $ 2.37万
• 依托单位: Nara Institute of Science and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17791000/
• 关键词: 破骨細胞; 骨代謝; NFAT2; 骨免疫学; 分泌タンパク質; シグナルシーケンストラップ; 膜タンパク質; 発現スクリーニング

本研究は破骨細胞で発現する分泌タンパク質および膜タンパク質を網羅的に探索し、特にNFAT2の下流因子に着目して機能解析することにより、NFAT2により制御される破骨細胞分化機構を分子レベルで理解することを目標とする。本年度は以下の3点の成果を得た。1.破骨細胞cDNAライブラリーから再度スクリーニングを行った。昨年度のスクリーニングとあわせて、独立クローン数1.14x10^6のcDNAライブラリーに対し1.49x10^6クローンをスクリーニングしたことから、cDNAライブラリーのほぼすべてのスクリーニングが完了したと考えた。この結果、合計50種の膜タンパク質、分泌タンパク質を見出した。2. 1.の結果から見出された各タンパク質の破骨細胞分化過程における発現プロフィールをRT-PCR法により決定した。3. 1.の解析から見出された膜タンパク質HB-EGF(Heparin-Binding EGF-like Growth Factor)は、申請者が以前に行ったNFAT2標的候補遺伝子の探索の際に見出され2006年に論文報告している分子である。そこで破骨細胞分化過程におけるHB-EGFの機能解析を行った。その結果、(1)破骨前駆細胞に強制発現すると破骨細胞分化過程が抑制されること、(2)分化抑制活性にはリガンド領域ではなく、ADAMプロテアーゼによる切断後に生じるC末端領域にあること、を見出した。HB-EGFの細胞外領域(N末端領域)が増殖因子として働くことが明らかにされているのに対し、C末端領域の機能は未知である。本研究の成果からHB-EGFのC末端領域を介した新規作用機構の存在が示唆された。

In this study, osteoclast cells were able to analyze the cell differentiation mechanism of cell differentiation mechanism, and to understand the molecular structure of the differentiation mechanism. In this study, it was found that the exploration of the cell network and the specific NFAT2 downflow factor were able to analyze the cell differentiation mechanism and control the cell differentiation mechanism of the cell differentiation mechanism. The following three achievements have been made this year. 1. The broken bone cDNA cell is broken, so do it again. Last year, the number of independent computers was 1.14x10

项目成果

Src homology 2 (SH2)-containing 5'-inositol phosphatase localizes to podosomes, and the SH2 domain is implicated in the attenuation of bone resorption in osteoclasts.

含有 Src 同源 2 (SH2) 的 5-肌醇磷酸酶定位于足小体，SH2 结构域与破骨细胞骨吸收的减弱有关。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Endocrinology 147・7
• 作者: Okazaki K;Yu H;Davies SR;Imamura T;Sandell LJ;S.Kawata;T.Ogawa;K.Yogo
• 通讯作者: K.Yogo

Retrovirus-mediated conditional immortalization and analysis of established cell lines of osteoclast precursor cells.

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2006.09.020
• 发表时间: 2006-11
• 期刊: Biochemical and biophysical research communications
• 影响因子: 3.1
• 作者: Shigehisa Kawata;Jun Suzuki;Masahiro Maruoka;Megumi Mizutamari;N. Ishida-Kitagawa;K. Yogo;P. Jat;T. Shishido

CCR1 acts downstream of NFAT2 in osteoclastogenesis and enhances cell migration

• DOI: 10.1359/jbmr.051001
• 发表时间: 2006-01-01
• 期刊: JOURNAL OF BONE AND MINERAL RESEARCH
• 影响因子: 6.2
• 作者: Ishida, N;Hayashi, K;Takeya, T
• 通讯作者: Takeya, T

A novel role of L-serine (L-Ser) for the expression of nuclear factor of activated T cells (NFAT) 2 in receptor activator of nuclear factor kappa B ligand (RANKL)-induced osteoclastogenesis in vitro.

L-丝氨酸 (L-Ser) 在核因子 kappa B 配体受体激活剂 (RANKL) 诱导的体外破骨细胞生成中对激活 T 细胞核因子 (NFAT) 2 表达的新作用。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Journal of Bone and Mineral Metabolism 24・5
• 作者: Okazaki K;Yu H;Davies SR;Imamura T;Sandell LJ;S.Kawata;T.Ogawa
• 通讯作者: T.Ogawa

Negative autoregulation of RANKL and c-Src signaling in osteoclasts

• DOI: 10.1007/s00774-007-0751-2
• 发表时间: 2007-06
• 期刊: Journal of Bone and Mineral Metabolism
• 影响因子: 3.3
• 作者: K. Yogo;N. Ishida-Kitagawa;T. Takeya