歯周病原菌のケモカイン阻害因子の研究

牙周病原菌趋化因子抑制剂的研究

• 批准号: 17791314
• 负责人: 矢島 彩子
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: The Nippon Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17791314/
• 关键词: ケモカイン; 若年性限局性歯周炎; Actinobacillus actinomycetemcomitans; Acttinobacillus actinomycetemcomitans

若年生限局性歯周炎の起因菌であるActinobacillus actinomycetemcomitansの細胞質中には、耐熱性で、ブロテイナーゼKに感受性のあるケモカイン阻害因子があることが知られており、本菌の病態発現に重要な役割を演じていると考えられている。私はこのケモカイン阻害因子の同定のために、ラット好中球内のケモカイン依存性カルシウム濃度上昇阻害活性を指標とした、A.actinomycがemcomitansトランスポゾン変異株のハイスルーブットスクリーニング系を確立し、未知のケモカイン阻害因子の遺伝学的同定を行った。現在までに約4500クローンのスクリーニングを行った結果、野生株と同等に発育し、且つケモカイン阻害作用を有さない変異株を6つ同定する事に成功した。得られた0株の変異株中の一株について、トランスポソン挿入変異の入った遺伝子を、挿入したトランスポゾン配列を利用したリバースPCRとシークエンス解析によって同定した結果、シグナルペブチドペブチダーゼ(SPP)をコードする遺伝子が挿入変異を受けていることを明らかにする事ができた。SPPはシグナルペブチダーゼによって切断された後のペブチドを、さらに分解する作用を持つ膜結合型のペブチダーゼである。意図するケモカイン阻害因子は可溶性であり、膜蛋白質であるSPPが目的の因子である事は考えにくいが、本因子の発現にはSPPが深く関与している事が示唆された。

众所周知，存在一种抗趋化因子抑制剂，该抑制剂在放线肌肌动症的细胞质中对蛋白酶K敏感且敏感，这是一种细菌，一种细菌会导致年轻人局部牙周炎，并被认为在细菌发展中起重要作用。为了鉴定这种趋化因子抑制剂，我使用趋化因子依赖性抑制活性在大鼠嗜中性粒细胞中建立了一个高通骨筛选系统，作为指标，并使趋化因子抑制剂的遗传鉴定。迄今为止，已经筛选了大约4,500个克隆，并且已经成功地鉴定出了六个突变菌株，这些突变体菌株已同样生长为野生菌株，没有趋化因子抑制作用。对于获得的零突变菌株之一，使用插入的转座子序列和测序分析来通过反向PCR鉴定含有转座子插入突变的基因，并且可以阐明编码基因编码信号粉状粘肽（SPP）的基因被插入插入突变。 SPP是一种结合膜结合的假丁物酶，在被信号粘肽酶裂解后具有进一步降解的香蒜剂的作用。预期的趋化因子抑制剂是可溶的，膜蛋白不太可能是靶因子，但已经提出SPP与该因子的表达深深相关。