小胞体蛋白質フォールディングセンサー「UGGT」の構造活性相関と阻害剤開発

内质网蛋白折叠传感器“UGGT”的构效关系及抑制剂开发

• 批准号: 17750170
• 负责人: 戸谷 希一郎
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17750170/
• 关键词: 糖蛋白質品質管理; 人工糖蛋白質; 合成糖鎖; UGGT; 構造活性相関; フォールディングセンサー; グルコシダーゼII; 分子クラウディング; 基質特異性; 糖タンパク質品質管理; 糖鎖合成; 合成基質; 特異性

粗面小胞体において糖タンパク質フォールディングセンサーとして働くUDP-グルコース糖タンパク質グルコース転移酵素(UGGT)は、ミスフォールドしたタンパク部分と、その表面に存在する高マンノース糖鎖の双方を認識し、糖鎖の非還元末端にグルコースをひとつ転移して、フォールディング促進シグナルであるモノグルコシル化糖鎖を生成する。その詳細な認識機構は不明であり、研究開始時には天然糖タンパク質およびその類縁体を基質とした定性的な解析しか報告されていなかった。天然糖タンパク質を基質として用いた場合、その糖鎖は多様な構造の混合物であるため、基質構造と活性の相関を厳密に評価することが不可能である。本研究では合成糖鎖基質を駆使することで、この問題点を克服した。今年度は昨年度までに報告した、UGGTの初の合成糖鎖基質の構造をもとに、様々な基質アナログや阻害剤を合成し、これらを用いた構造活性相関研究を行った。その結果、UGGTは高マンノース型糖タンパク質のコア糖鎖構造Man_3GlcNAc_2、および空間的にその近傍に位置する疎水性パッチを認識することが分かった。またこれらの研究過程で検出感度、反応性ともに向上した高機能な第二世代の基質開発に成功した。さらに関連する合成糖鎖を用いて、UGGTへの基質受け渡しを司るグルコシダーゼIIの性質が、疑似細胞内環境である分子クラウディング条件下において通常のin vitro assayの系と大きく異なるという興味深い現象を見出した。

The rough-faced small cell bodies are full of sugar, enzyme transferase (UGGT), sugar, sugar We need to promote the production of sugar by melting sugar. At the beginning of the study, there is an analytical report on the nature of the nature of natural sugar, natural sugar and natural sugar. The natural sugar compound was used in combination, the sugar compound was used to make the mixture, and the compound was used to make the active phase, which was not possible. The purpose of this study is to overcome the problems in the synthesis of sugars. This year, last year's report, UGGT, the synthetic sugar base, the synthetic sugar, the synthetic sugar, the synthetic sugar and the active phase. The results showed that UGGT made Man_3GlcNAc_2 with high concentration of sugar and sugar, and the proximity of the air space was marked with water-based knowledge and identification. In the course of the research process, the sensitivity and reflexivity of the research process can lead to the success of the second generation of high-level aircraft. In the case of synthetic sugars, such as II, UGTTO, UGGT, and so on, the temperature of the synthetic sugar is very high. Under the condition that the synthetic sugar is used, UGTT and UGGT are used to treat II. Under the condition that the environment is suspected to be in the cell, it is generally known that the temperature is very high in the environment.

项目成果

分子クラウディング環境におけるN-結合型糖タンパク質プロセシング酵素の性状

分子拥挤环境中 N 连接糖蛋白加工酶的特性

• 发表时间: 2008
• 作者: Takashi Matsuo;Takashi Tsuruta;Keiko Maehara;Hideaki Sato;Yoshio Hisaeda;Takashi Hayashi;Norihito Kawasaki;Kiichiro Totani;Motohiro Nonaka;Daisuke Yamaguchi;Kiichiro Totani;Tadashi Suzuki;Ichiro Matsuo;Kiichiro Totani;戸谷 希一郎;Kiichiro Totani;Kiichiro Totani;Midori A. Arai;Shinya Hagihara;Ichiro Mastuo;Yukishige Ito;Sachiko Nakamura-Tsuruta;Norihito Kawasaki;松尾一郎;高谷万紀;戸谷希一郎;戸谷希一郎
• 通讯作者: 戸谷希一郎

High-mannose-type glycan modifications of dihydrofolate reductase using glycan-methotrexate conjugates.

• DOI: 10.1016/j.bmc.2006.04.001
• 发表时间: 2006-08
• 期刊: Bioorganic & medicinal chemistry
• 影响因子: 3.5
• 作者: K. Totani;I. Matsuo;Y. Ihara;Yukishige Ito

VIPL has sugar-binding activity specific for high mannose-type N-glycans,and glucosylation of the α1,2 mannotriosyl branch blocks its binding

VIPL对高甘露糖型N-聚糖具有特异的糖结合活性，α1,2甘露三糖基分支的糖基化可阻断其结合

• 发表时间: 2007
• 期刊: Glycobiology 17
• 作者: Takashi Matsuo;Takashi Tsuruta;Keiko Maehara;Hideaki Sato;Yoshio Hisaeda;Takashi Hayashi;Norihito Kawasaki;Kiichiro Totani;Motohiro Nonaka;Daisuke Yamaguchi
• 通讯作者: Daisuke Yamaguchi

Comprehensive synthesis of ER related high-mannose-type sugar chains by convergent strategy

聚合策略综合合成ER相关高甘露糖型糖链

• 发表时间: 2006
• 期刊: Tetrahedron 62
• 作者: Takashi Matsuo;Takashi Tsuruta;Keiko Maehara;Hideaki Sato;Yoshio Hisaeda;Takashi Hayashi;Norihito Kawasaki;Kiichiro Totani;Motohiro Nonaka;Daisuke Yamaguchi;Kiichiro Totani;Tadashi Suzuki;Ichiro Matsuo
• 通讯作者: Ichiro Matsuo

Analysis of the Sugar-binding Specificity of Mannose-binding Jacalin-related Lectins by Frontal Affinity Chromatography - an approach to functional classification

通过额亲和色谱法分析甘露糖结合 Jacalin 相关凝集素的糖结合特异性 - 一种功能分类方法

• 期刊: FEBS Journal (印刷中)
• 作者: Takashi Matsuo;Takashi Tsuruta;Keiko Maehara;Hideaki Sato;Yoshio Hisaeda;Takashi Hayashi;Norihito Kawasaki;Kiichiro Totani;Motohiro Nonaka;Daisuke Yamaguchi;Kiichiro Totani;Tadashi Suzuki;Ichiro Matsuo;Kiichiro Totani;戸谷 希一郎;Kiichiro Totani;Kiichiro Totani;Midori A. Arai;Shinya Hagihara;Ichiro Mastuo;Yukishige Ito;Sachiko Nakamura-Tsuruta
• 通讯作者: Sachiko Nakamura-Tsuruta