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伝染性軟属腫ウイルスDNAポリメラーゼの機能解析

传染性软疣病毒DNA聚合酶的功能分析

基本信息

批准号：
18591235
负责人：
渡邊孝宏
金额：
$ 2.71万
依托单位：
International University of Health and Welfare (2008-2009)The University of Tokyo (2006-2007)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2009
项目状态：
已结题

项目摘要

昨年までの研究で、伝染性軟属腫ウイルスのDNAポリメラーゼ遺伝子をin vitroで発現させ、DNAポリメラーゼの活性を[<32>^P]dATPの伸長DNAへの取り込み量によって定量する実験系を確立した。さらにこの系を用いて、ウイルスのDNAポリメラーゼ活性が20-50μMのアシクロビル、ビダラビン、シドフォビルの三リン酸化物で抑制されることを確認している。平成20年度は、MCVの増殖抑制効果を判定するための組織染色法を確立した。実際にウイルスに完成したヒトの皮膚を用い、伝染性軟属腫ウイルスのearly, intermediate, late遺伝子の発現の局在および時間的変化について検討した。これら3種類の遺伝子のmRNAは表皮ケラチノサイト内で同じような挙動を示すこと、すなわち基底層の直上1-5層に位置する有棘層で強く発現し、ウイルス粒子の成熟化につれて発現が減弱することが判明した。また、ヒト乳頭腫ウイルスの場合と同様、late遺伝子に比べearly遺伝子の発現がはるかに多いことも明らかになった。今後は、in vitroでみられたウイルスDNAポリメラーゼ阻害作用がin vivoでもみられるかどうか、すなわちヒトの皮膚において伝染性軟属腫ウイルスの増殖を抑制するかどうかについて検討する予定である。

The study conducted last year established a quantitative system for the detection of DNA fragments in vitro <32>and for the detection of DNA fragments in vitro. In addition, it was confirmed that the activity of the DNA fragment in the system was inhibited by 20-50μM of the tri-acid compound of the protein, protein and protein. Hiroyuki 20 years, MCV proliferation inhibition effect determination, tissue staining method to establish In fact, the development of early, intermediate, and late genes in the development of skin and soft tissue is studied in the middle of time. The mRNA expression of these three kinds of genes was strongly detected in the basal layer 1-5, and the mature mRNA expression of these three kinds of genes was weakened. Also, in the same way as in the case of swollen nipples, the occurrence of late genes is more frequent than that of early genes. In the future, in vitro, the inhibition effect of DNA diversity on the proliferation of soft tissue in vivo will be determined.