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伝染性軟属腫ウイルスの表面抗原の解析

传染性软疣病毒表面抗原分析

基本信息

批准号：
09770608
负责人：
渡邊孝宏
金额：
$ 1.22万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770608/
关键词：
伝染性軟属腫ウイルス抗原蛋白伝染性軟属腫ウイルウス

项目摘要

伝染性軟属腫ウイルス(molluscum contagiosum virus,MCV)ゲノムを分離精製し、MCV1型バリアントの全長を含む(両端部を除く)遺伝子ライブラリーを作製した。各遺伝子が挿入された組み換え牛痘ウイルスをHeLa細胞に感染させ、蛋白の発現を試みた。伝染性軟属腫患者の血清を反応させたところ、open reading frame MC08およびMC084Lにコードされている70kDおよび34kDの蛋白がMCVの主要な抗原性蛋白であることが判明した。さらに70kD蛋白と反応するウサギ抗血清が免疫電顕法にてウイルス粒子表面に沈着したことから、この蛋白はMCV粒子表面に存在することが示された。MC133Lの一次構造を検討したところ、大きな疎水性領域が2カ所存在し、N末端側の疎水性領域は膜へのシグナル配列であること、C末端側の疎水性領域は膜貫通部分であることが予想された。そこでMC133Lの膜貫通領域の外側の部分のみを発現させたところ、培養上清に70kD蛋白と同じ抗原性をもった蛋白が検出された。この培養上清をそのままプレートにコートしてELISAを行なったところ、伝染性軟属腫の患者血清の約80%で陽性反応がみられた。健常人では陽性率は20%であった。この検出系はMCV粒子をプレートにコートしてEHSAを行なった場合よりも感度が高く、伝染性軟属腫の疫学調査に有用であると考えられた。

Molluscum contagiosum virus (MCV) must be isolated and purified, and MCV type 1 must be produced over the entire length of the virus (except for the end). The virus was detected in HeLa cells and protein expression was tested. The 70kD and 34kD proteins in the serum of patients with infectious soft tissue tumors were identified by open reading frames MC08 and MC084L 70kD protein and antiserum are present on the surface of MCV particles by immunoelectroanalysis. MC133L primary structure analysis, large water domain, 2 water domain, N terminal side water domain, membrane array, C terminal side water domain, membrane penetration The outer part of MC133L membrane was found in the supernatant of the culture medium and the antigenic protein was found in the supernatant. About 80% of the sera from patients with malignant soft tissue tumors were positive. The positive rate of healthy people is 20%. This is the case with MCV particles, which are highly sensitive and useful in epidemiological investigations.