新規エナメルタンパク・アメロティンの機能解析

新型釉质蛋白amelotin的功能分析

• 批准号: 18791586
• 负责人: 岩崎 剣吾
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18791586/
• 关键词: エナメルタンパク; 細胞分化; 骨芽細胞

近年エナメル抽出タンパクが歯周組織の再生に有用である事が多くの報告で示され、そのメカニズムを解明する点においてエナメルタンパクの歯周組織細胞への影響が注目されている。本研究の目的は新規エナメル芽細胞由来タンパクであるアメロティンの石灰化における作用、特に骨芽細胞分化への影響を検討する事である。マウス前骨芽細胞細胞株MC3T3-E1、およびマウス中胚葉未分化細胞株10T1/2細胞にアメロティン発現ベクターを遺伝子導入後、アスコルビン酸、Dexamethasone、β-グリセロリン酸によって骨芽細胞分化を誘導し、経時的に骨芽細胞分化マーカー遺伝子の発現を検討した。また、同時に石灰化結節の形成量の比較検討も行なった。アメロティン遺伝子を遺伝子導入した10T1/2/細胞は石灰化においてコントロール群と差は無く、また、骨芽細胞分化マーカー遺伝子であるRunx2,ALPのmRNA発現も変化を認めなかった。一方、MC3T3-E1はアメロティン遺伝子導入により石灰化結節の形成が促進された。また、カルシウム沈着量も亢進した。しかし、Runx2,ALPなどの骨芽細胞分化マーカー遺伝子の発現には変化が見られなかった。これらの結果より、アメロティンは骨芽細胞分化には大きな影響をおよぼさないが、石灰化を促進する可能性が示唆された。アメロティンは分泌タンパクであり、細胞外マトリクスとして石灰化の促進に関与する可能性がある。現在、アメロティン遺伝子の安定株とリコンビナントタンパクを作製中であり、石灰化におけるアメロティンの作用、さらにはアメロティンを用いた歯周組織再生治療の可能性についてさらに詳しく検討する予定である。

近年来，许多报道表明，搪瓷提取蛋白可用于牙周组织的再生，为了澄清机制，搪瓷蛋白对牙周组织细胞的影响吸引了人们的注意。这项研究的目的是研究一种新型搪瓷源性蛋白质蛋白（尤其是成骨细胞分化）的杏仁蛋白的作用。将氨基链球菌表达载体转染到小鼠前结成细胞系MC3T3-E1和中胚层未分化的细胞系10T1/2细胞后，抗坏血酸，脱氧乙酮和β-甘油磷酸盐和β-甘油磷酸盐磷酸盐和表达的抑制性分化诱导了成骨细胞分化。同时，我们还比较并检查了形成的钙化结节的量。用氨基链蛋白基因转染的10T1/2/细胞与钙化中的对照组没有差异，并且成骨细胞分化标记基因RUNX2和ALP的mRNA表达没有变化。同时，MC3T3-E1通过引入氨基蛋白酶基因促进了钙化结节的形成。钙沉积量也增加了。然而，在成骨细胞分化标记基因（例如Runx2和alp）的表达中没有观察到任何变化。这些结果表明，氨基蛋白蛋白对成骨细胞分化没有显着影响，但可能会促进钙化。氨基蛋白是一种分泌蛋白，可以参与促进钙化作为细胞外基质。目前，正在产生淀粉蛋白基因和重组蛋白的稳定菌株，我们计划进一步探索氨基链蛋白酶在钙化中的作用，以及使用Amelotin进行牙周组织再生治疗的潜力。