新規エナメルタンパク・アメロティンの機能解析

新型釉质蛋白amelotin的功能分析

• 批准号: 18791586
• 负责人: 岩崎 剣吾
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18791586/
• 关键词: エナメルタンパク; 細胞分化; 骨芽細胞

近年エナメル抽出タンパクが歯周組織の再生に有用である事が多くの報告で示され、そのメカニズムを解明する点においてエナメルタンパクの歯周組織細胞への影響が注目されている。本研究の目的は新規エナメル芽細胞由来タンパクであるアメロティンの石灰化における作用、特に骨芽細胞分化への影響を検討する事である。マウス前骨芽細胞細胞株MC3T3-E1、およびマウス中胚葉未分化細胞株10T1/2細胞にアメロティン発現ベクターを遺伝子導入後、アスコルビン酸、Dexamethasone、β-グリセロリン酸によって骨芽細胞分化を誘導し、経時的に骨芽細胞分化マーカー遺伝子の発現を検討した。また、同時に石灰化結節の形成量の比較検討も行なった。アメロティン遺伝子を遺伝子導入した10T1/2/細胞は石灰化においてコントロール群と差は無く、また、骨芽細胞分化マーカー遺伝子であるRunx2,ALPのmRNA発現も変化を認めなかった。一方、MC3T3-E1はアメロティン遺伝子導入により石灰化結節の形成が促進された。また、カルシウム沈着量も亢進した。しかし、Runx2,ALPなどの骨芽細胞分化マーカー遺伝子の発現には変化が見られなかった。これらの結果より、アメロティンは骨芽細胞分化には大きな影響をおよぼさないが、石灰化を促進する可能性が示唆された。アメロティンは分泌タンパクであり、細胞外マトリクスとして石灰化の促進に関与する可能性がある。現在、アメロティン遺伝子の安定株とリコンビナントタンパクを作製中であり、石灰化におけるアメロティンの作用、さらにはアメロティンを用いた歯周組織再生治療の可能性についてさらに詳しく検討する予定である。

In recent years, there have been many reports on the useful effects of tooth extraction on the regeneration of peridental tissues, and the effects of tooth extraction on the regeneration of peridental tissues have been noticed. The purpose of this study was to investigate the effects of calcification on the origin and differentiation of new bone bud cells, especially on bone bud differentiation. After introduction of the gene, induction of differentiation of pre-embryonic bone bud cell line MC3T3-E1, pre-embryonic bone bud cell line 10T1/2, pre-embryonic bone bud cell line MC3T3-E1, pre-embryonic bone bud cell line MC3T3-E1/2, pre-embryonic bone bud cell line MC3T3-E1/E1, pre-embryonic bone bud cell line MC3T3-E1/E1, pre-embryonic bone bud cell line MC Comparison of the amount of calcified nodules formed at the same time The expression of ALP mRNA was detected by PCR. The results showed that ALP mRNA expression was significantly higher than that of ALP mRNA. One side, MC3 T3-E1, was introduced to promote the formation of calcified nodules. It's not easy to get rid of it. The differentiation of bone bud cells in vitro was observed in RUNX2,ALP 2,ALP 3, ALP 4, ALP 5, ALP 6, ALP 7, ALP 7, ALP 8, ALP 8, ALP 9, ALP 9, ALP The results showed that the differentiation of bone bud cells was greatly influenced by calcification. It is possible to promote calcareousness in vitro. Now, in the process of preparation, the role of calcification in the treatment of periodontal tissue regeneration is discussed.