炎症性サイトカインTNF-α新規転写因子LITAFの発現制御に関する研究

炎症细胞因子TNF-α新型转录因子LITAF的表达调控研究

• 批准号: 18890121
• 负责人: 塩見 信行
• 金额: $ 1.66万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (Start-up)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18890121/
• 关键词: 炎症制御; 転写因子; LITAF; LPS; 炎症性サイトカイン

TNF-αは歯周病の病態に深く関わるサイトカインとして理解されている。最近,我々の研究グループがヒトTNF-αの新しい転写因子LITAF(LPS-induced TNF-α factor)を発見したことにより,LITAFを介する刺激伝達系に関して,少しずつ解明され始めている。しかしながら,この因子そのものの発現制御に関する研究はまだまだ発展段階である。我々は,LITAFプロモーター領域を突きとめ,その発現制御に関わる因子の候補を見つけることに成功した(Shiomi et al. FEMS Immunol Med Microbiol, 2006.)。その際,プロモーターアッセイの結果から,AP-1,NF-IL6結合予想部位を持つ領域に活性が高いことが判明した。そこでAP-1,NF-IL6の産生や活性化を司るMAPKに着目し,ヒト単球細胞株においてこのキナーゼを介する系を阻害すると,LPS刺激によるLITAFの発現にどのような影響があるかを検討した。始めに、MAPKファミリーの一つであるERK(p42/p44)の阻害剤であるPD98059を用いると,LITAFの発現量が有意に減少し,MAPKファミリーの一つであるJNKの阻害剤であるSP600125を用いると,LITAFの発現量に影響しないことが解明された。したがって,LITAFがLPS刺激によってMAPKファミリーのERKを介して発現する可能性があることが示唆された。次にLITAFプロモーターのAP-1とNF-IL6の結合予想部位をそれぞれmutationさせ,ルシフェラーゼ発現ベクターにクローニングした。今後はそれらのmutantを用いてLPS刺激におけるLITAFプロモーターのルシフェラーゼ活性の増減を解析し,LPS刺激においてLITAFプロモーターのどの領域がコンセンサスシークエンスなのかを突き止めていく予定である。

TNF-α is the disease of the week and the disease is deep and deep. Recently, I have been studying the new factor LITAF (LPS-induced TNF-α) in TNF-α. factor) を発见したことにより, LITAF を Introduction するstimulation 伝大组 に关して, 小しずつ解明され开 めている.しかしながら, このfactor そのものの発开户 に关する Research はまだまだ発开户 stages である. I 々は, LITAF プロモーター区 を出きとめ, その発行淏わるfactor の candidate を见つけることに Success した(Shiomi et al. FEMS Immunol Med Microbiol, 2006.). It was found that AP-1 and NF-IL6 bind to the desired site and have high activity in the field.そこでAP-1, NF-IL6 production and activation をるMAPK に目し, ヒト単spherical cell line においてこのキナーゼを introduced the する system を hindered す る と, LPS stimulated に よ る LITAF の発 appeared に ど の よ う な affected が あ る か 検し た. Hajime, MAPK ファミリーの一つであるERK (p42/p44) の hindering cutting であるPD98059 いると, LITAF の発existing amount が に REDUCTION小し,MAPKファミリーの一つであるJNKの牤であるSP600 125を用いると, LITAF's actual amount of influence しないことが解明された.したがって, LITAF がLPS stimulates によってMAPK ファミリーのERKを Introduction して発appears するpossibility があることが Shows 唆された. The combination of LITAF プロモーターのAP-1 and NF-IL6 is expected to be combinedぞれmutationさせ,ルシフェラーゼ発成ベクターにクローニングした. From now on, we will use LPS to stimulate LITAF LITAF activity in the future, LPS stimulates the field of LITAFンセンサスシークエンスなのかを出き出めていく氧ある.