L型DNA固定化DNAマイクロアレイの開発とCAGリピート結合分子の開発

L型DNA固定化DNA微阵列和CAG重复结合分子的开发

• 批准号: 06J03285
• 负责人: 林 剛介
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06J03285/
• 关键词: 翻訳活性化; アンチセンス; PURESYSTEM; GFP; aptamer; azobenzene; photoswitch; SPR; in vitro selection; L型DNA; SPR imaging; PCR; SNP

生体内で遺伝子発現を抑制する方法としてRNAi法やアンチセンス法がある。これらの方法ではmRNAに対して相補的な配列を持つ一本鎖RNAあるいはDNA(アンチセンスオリゴ)が機能の中核を担っている。アンチセンス法ではアンチセンスオリゴがmRNAと相補鎖を形成した後、RNase HによってmRNAの切断が起こる経路、または、相補鎖形成が翻訳開始複合体の形成を阻害する経路のどちらかでタンパク質の翻訳を抑制する。このように、遺伝子発現を翻訳段階で抑制する方法論は確立されてきているが、逆に、遺伝子発現を促進させる方法論はまだほとんどない。今回我々は、RNase Hが存在しない無細胞翻訳系で、GFPメッセンジャーRNAの翻訳領域に相補的なアンチセンスオリゴが、翻訳反応を促進させることを見出した。我々は、再構成系の無細胞翻訳系であるPURESYSTEMを用いて、GFPの翻訳反応を行った。この反応系中に、GFPのmRNAに対するアンチセンスオリゴを加えると、リボソーム結合サイトや開始コドン付近にハイブリダイズするものは、翻訳されるGFPタンパク量の低下を示したのに対し、より下流にハイブリダイズするアンチセンスオリゴのいくつかは、1.5〜2倍程度の翻訳量の上昇を促す事が確認された。これは、アンチセンスオリゴのmRNAの複合体形成が、より翻訳開始複合体の形成に有利なmRNA構造を誘起したためだと考えている。これからより詳細に調査して行きたい。

In vivo, the method of inhibition was detected. The RNAi method was used to detect the antitumor effect. The equipment of the mRNA system is responsible for a copy of the RNA information system (DNA) in the machine power system. After the formation of the mRNA phase, RNase H and mRNA cut off the road, cut off the bridge, and form the combination of the beginning and the beginning of the phase to form the block block. In order to improve the performance of the system, the method is to make sure that it is necessary to improve the performance of the system. This time, there are some problems in our company, RNase H, such as the system of cell flip, the system of GFP, the system of RNA, the field of communication, and the promotion of reversal. I would like to reconstitute the system. I would like to use the word "PURESYSTEM" and "GFP" to reverse the line. In the middle of the system, the GFP mRNA system does not require any additional information, the combination of the information system and the operating system starts to pay the price close to the price of the product, and the quantity of the product is lower than that of the control group. If the quantity is low, please contact us. 1.5 times the "turnover volume" to urge you to confirm your mistakes. It is beneficial to the formation of the mRNA complex and the opening of the complex, which is beneficial to the creation of mRNA. I don't know. I don't know.

项目成果

アンチセンスオリゴヌクレオチドを用いた無細胞翻訳系中でのGFPメッセンジャーRNAの翻訳促進

使用反义寡核苷酸在无细胞翻译系统中促进 GFP 信使 RNA 的翻译

• 发表时间: 2008
• 作者: Hayashi G.;Hagihara M.;Nakatani K.
• 通讯作者: Nakatani K.

Reversible regulation of binding between a photoresponsive peptide and its RNA aptamer

光响应肽与其RNA适体之间结合的可逆调节

• 发表时间: 2007
• 期刊: Nucleic Acid Symposium Series 51
• 作者: Hayashi G.;Hagihara M.;Dohno C.;Nakatani K.
• 通讯作者: Nakatani K.

Photoregulation of a peptide-RNA interaction on a gold surface

• DOI: 10.1021/ja071298x
• 发表时间: 2007-07-18
• 期刊: JOURNAL OF THE AMERICAN CHEMICAL SOCIETY
• 影响因子: 15
• 作者: Hayashi, Gosuke;Hagihara, Masaki;Nakatani, Kazuhiko
• 通讯作者: Nakatani, Kazuhiko

光応答性リボスイッチを指向したRNA-リガンド間の結合制御

RNA-配体与光响应核糖开关结合的调控

• 发表时间: 2008
• 作者: Hayashi G.;Hagihara M.;Dohno C.;Nakatani K.
• 通讯作者: Nakatani K.

光を用いたRNA-ペプチド結合のスイッチング

利用光切换 RNA-肽键

• 发表时间: 2007
• 作者: Hayashi G.;Hagihara M.;Dohno C.;Nakatani K.
• 通讯作者: Nakatani K.