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ミトコンドリアを標的とする多重型・多機能性エンベロープ型ナノ構造体の開発

开发针对线粒体的多重多功能包膜型纳米结构

基本信息

批准号：
06J04284
负责人：
山田勇磨
金额：
$ 0.64万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

研究目的本申請研究では、疾患細胞ミトコンドリア(Mt)を標的とした新規送達システムの開発を目的とする。研究戦略は、細胞膜とMt膜を突破するために、エンベロープを多重構造にする(多重型・多機能性ナノ構造体:多重型MEND)。外膜には癌細胞の標的に用いられるトランスフェリン、内膜にはMt移行性ペプチド(MTS)を付加し、ナノ粒子のまま癌細胞のMt内へ送達するシステムを開発する。細胞膜、ミトコンドリア膜は膜融合を介して突破する。現在までに、MTS修飾MENDの構築とその評価を行ったので、ここで報告する。(1)MTS修飾MENDの構築1)MTS脂質誘導体の合成を行い、質量分析により目的産物が得られた事を確認した。2)MTS修飾MENDの構築:MENDにMTS脂質誘導体を導入した構造体の調製に成功した。(2)ミトコンドリア移行能評価蛍光標識を施したMENDをHeLa細胞ホモジネート溶液に加え、Mtと結合したMENDの蛍光強度を求めた。R8(今まで用いていたMt結合素子)を修飾したMENDを用いた場合には、10%程度の移行が確認された。一方、MTSを修飾した場合には、移行率が劇的に上昇し、従来のキャリアよりも5倍以上の移行量が確認された。(3)MTS修飾MENDの細胞内動態観察本実験では、GFPを封入した各種MENDを細胞に添加し、その細胞内動態を共焦点レーザースキャン顕微鏡によって観察した。R8(細胞導入素子)-LPを用いた場合、内封物質GFP単独のドットが多く観察された。MTS-MENDを用いた場合には、キャリアの細胞導入量が極めて低くGFPはほとんど観察されなかった。一方、R8＆MTS-MENDを用いた場合、GFPの多くがMtで観察された。以上の結果より、R8とMTSの両修飾が、細胞内Mtへの選択的送達を可能とする事を明らかとした。

Objectives this application では, sickness, cell ミトコンドリア (Mt) を mark とした new rules to システムの open 発を purpose とする. Research 戦 slightly はと Mt membrane, membrane を breakthrough するために, エンベロープを multiple tectonic にする (heavy, more functional ナノ constructs: more heavy MEND). Outer membrane には cancer にの mark with いられるトランスフェリン, lining には Mt migration sex ペプチド (MTS) を pay plus し, ナノ particle のまま cancer cells within の Mt へ served するシステムを open 発する. Cell membrane, ドリアトコドリアドリア membrane membrane fusion を interface て breakthrough する. Now までに, MTS modified MEND <s:1> construction とそ <s:1> evaluation 価をったでで, <s:1> で report する. (1) the MTS modified MEND の building 1) MTS induced lipid body line をいの synthesis, quality analysis によりが objective product must られたを sure した. 2)MTS modified MEND MEND mend construction :MENDにMTS lipid inducer を was introduced into the <s:1> た structure and <s:1> modulated に successfully, <s:1> た. (2) ミトコンドリア migration can review 価蛍 light logo を shi した MEND を HeLa ホモジネーにえ, Mt とト solution combining した MEND の蛍 light intensity を o めた. R8 (now まで with いていた Mt) combined with hormone) を modified した MEND を with いた occasions には, degree of 10% の transitional が confirm された. One party, the MTS を modified した occasions にはが drama, migration rate rising にし, 従のキャリアよりも transition volume of more than 5 times のが confirm された. (3) the MTS modified MEND の intracellular dynamic 観 examine this be 験では, GFP をし sealed た various MEND を cell に add し, その intracellular dynamic を total focus レーザースキャン顕 micromirror によって観 examine した. R8(cytoattractant)-LPを is used in をた situations, and the encapsulated substance GFP単 is unique to ドットが and く観 to observe された. MTS - MEND を with いた occasions には, キャリアの cells import quantity がめ extremely low てく GFP はほとんど観 examine されなかった. One party, R8&MTS-MENDを uses をた occasions, GFP <s:1> multiple くがMtで観 observe された. の above results より, R8 と MTS の struck modified が, intracellular Mt への sentaku served を may とする matter を Ming らかとした.