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出芽酵母におけるtRNA核内輸送機構の解明

酿酒酵母 tRNA 核转运机制的阐明

基本信息

批准号：
06J06492
负责人：
高野晃
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06J06492/
关键词：
tRNA 出芽酵母 Ssa2 核内輸送スプライシングアミノ酸飢 Ssa1

项目摘要

transfer RNA(tRNA)は、messenger RNA(mRNA)上のタンパク質情報を翻訳する際、mRNAとタンパク質問のアダプター分子として働いている。従来、tRNAは核で転写された後、様々なプロセシングを受け、タンパク質翻訳に携わるために核外へ輸送されて機能している。しかし、本研究で成熟化後のtRNAが細胞質から核へ再輸送されることを明らかとした。またこの輸送はエネルギーを必要とする能動輸送であり、細胞は何らかの意義を持ってtRNAの核内プールを作り出していると考えられる。本研究では、生化学的にサイトゾルの新規tRNA結合タンパク質から、tRNA核内輸送因子となる候補を検索したところ、サイトゾルHsp70であるSsa2pが得られた。酵母にはサイトゾルHsp70ファミリーとしてSsal-4pが存在しているが、特にSsalpはSsa2pと非常に高いホモロジーを持つ。SsalpとSsa2pを比較検討したところ、Ssa2pのみがtRNAと直接結合すること、また、Ssa2pのみがアミノ酸飢餓時でのtRNA核内輸送経路に関わることが明らかとなった。さらにSsa2pの破壊株を用いて、酵母アミノ酸飢餓応答時に発現誘導されるHIS4mRNAの発現量を指標にして、tRNA核内輸送とアミノ酸飢餓応答経路について検討したところ、Ssa2pがこの経路に影響を与えることが明らかとなった。tRNAの核内輸送の生理的意義の役割の一部が明らかとなったと言える。

Transfer RNA(tRNA) and messenger RNA(mRNA) are the most common types of mRNA in the world. In addition, tRNA can also be used as a nuclear transport agent. In this study, tRNA was retransported from cytoplasm to nucleus after maturation. It is necessary to transport tRNA into the nucleus. In this study, new tRNA binding factors were found in biochemical studies. Sal-4p exists in the medium, Sal-2p exists in the medium, and Sal-4p exists in the medium. Ssalp and Ssa2p are compared and discussed. Ssa2p and tRNA bind directly. Ssa2p and tRNA transport pathway are related to acid starvation. In addition, Ssa2p was induced in yeast cells during acid starvation, and HIS4 mRNA expression was measured as an indicator of tRNA nuclear transport and acid starvation pathway. The physiological significance of tRNA transport in the nucleus is partly explained by the following: