抑制性アダプター蛋白質Lnkによる造血制御機構の解析と免疫系再構築への応用

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Lnk欠損マウスは正常マウスに比して5倍の血小板数を示す。巨核球前駆細胞から血小板産生に至る過程におけるLnkの作用点及び作用機構を検討した。Lnk欠損マウスでは巨核球前駆細胞が増加し、トロンボポイエチンに対する反応性も亢進していた。骨髄より調製した巨核球を用いてトロンボポイエチンシグナルを解析した結果、Erkの活性化がLnk欠損巨核球で助長していた。トロンボポイエチンとインテグリンリガンドの一つVCAM-1による共刺激は、野生型巨核球においてトロンボポイエチン刺激によるStat5のリン酸化を低下させる一方でErk及びp38の活性化を増強した。Lnk欠損巨核球ではいずれの活性化もBSA刺激と比べ変化が見られなかった。BSA上ではともに類似した血小板産生形態変化を示したが、VCAM-1上での野生型巨核球は平たい細胞体からより分岐した血小板前駆体を形成するのに対し、Lnk欠損巨核球は辺縁のみならず細胞体からも血小板前駆体を放出した。以上の結果よりLnkがトロンボポイエチンシグナルを負に制御することにより巨核球成熟を抑制しているだけでなく、インテグリン刺激による血小板放出機構にも関与していることが示唆された。さらに、成熟血小板機能におけるLnkの役割を検討した。Lnk欠損により血餅退縮に異常が見られた。インテグリンα2bβ3のシグナルを解析した結果、c-Src及びFynがインテグリン刺激依存性にLnkに会合することが分かった。また、Lnk欠損血小板ではインテグリン刺激によるβ3のリン酸化が減弱しており、刺激依存性に見られるFynのインテグリンβ3への会合も見られなかった。インテグリンを介した骨格制御におけるLnkの機能及び血栓形成におけるLnk依存性経路の重要性が示された。