超早期がん診断を可能にする蛍光プローブの開発

开发能够实现超早期癌症诊断的荧光探针

• 批准号: 06J11629
• 负责人: 藤川 雄太
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06J11629/
• 关键词: 蛍光プローブ; GST; ケミカルバイオロジー; がん

GST(Glutathione S-transferase)は第二相薬物代謝酵素として知られており、細胞内の活性代謝物や毒性代謝物などのグルタチオン化を触媒するダイマー型酵素である。GSTは主に細胞質型サブタイプとして、GSTα,GSTμ,GSTπが知られているが、特にGSTπは様々ながん細胞にて過剰発現が観察されている。このようなGSTP過剰発現は、がん細胞における多剤耐性機構に強く関わっていることが知られている。また活性を持たないモノマー型GSTπはアポトーシスに関与するJNKの内在性阻害剤であることが知られている。しかしながら細胞内GSTの活性がどのように制御されているか、これまで明らかとなっていない。それは細胞内で利用可能なGST活性検出法が開発されていないためである。私は昨年度、可視光領域に蛍光波長を有するGST活性検出プローブDNAT-Meを開発した。そこでがん細胞における抗癌剤耐性機構の一端を明らかにするために「プローブの改良」を行い、改良したプローブdiCl-DNAT-Meを用いて「生細胞におけるGST活性イメージング」を行った。まず「プローブの改良」では、生理的pHにおける化合物の蛍光特性の安定化を図った、蛍光団にクロロ基を導入した新規化合物diCl-DNAT-Meを開発した。また「生細胞におけるGST活性イメージング」の結果からは、従来の方法であるLysateによる活性測定法は生細胞における活性を正しく反映していないことが明らかとなった。これは細胞内にGST活性制御機構が存在していることを示唆する結果であり、活性検出蛍光プローブの開発なくして達成できなかったものと考えられる。今後は細胞内における制御因子の解明、およびその生理学的意義について、検討していく。

GST(Glutathione S-transferase) is an enzyme that catalyzes the metabolism of second phase metabolites, active metabolites and toxic metabolites in cells. GST α, GST μ,GST π and GSTα,GSTμ,GSTπ are known to be present in the cytoplasm,GSTπ is known to be present in the cytoplasm, and GST α, GST μ, GST π is known to be present in the cytoplasm. The GSTP is a multi-organ system that can be used to detect and detect the presence of cells. The intrinsic resistance of JNK is known. The activity of GST in the cell is controlled by the enzyme. It is possible to use GST activity assay in cells. In the field of visible light, GST activity in the wavelength of light has been developed. The anti-cancer resistance mechanism of the cell is clearly defined as "improvement of the cell" and "improvement of the cell". The new compound diCl-DNAT-Me was developed by introducing a new photoactive group into the stable photoactive properties of compounds with physiological pH values. The results of the assay of GST activity in living cells are different from those of the assay of GST activity in living cells. The results of this study indicate that the mechanism for regulating GST activity in cells exists. In the future, the physiological significance of intracellular control factors will be clarified and discussed.

项目成果

新規GST活性検出蛍光プローブの開発とその応用

新型GST活性检测荧光探针的研制及其应用

• 发表时间: 2008
• 作者: 藤川雄太;浦野泰照;井上英史;長野哲雄
• 通讯作者: 長野哲雄

Design and Synthesis of Highly Sensitive Fluorogenic Substrates for Glutathione S-Transferase and Application for Activity Imaging in Living Cells

• DOI: 10.1021/ja802423n
• 发表时间: 2008-11-05
• 期刊: JOURNAL OF THE AMERICAN CHEMICAL SOCIETY
• 影响因子: 15
• 作者: Fujikawa, Yuuta;Urano, Yasuteru;Nagano, Tetsuo
• 通讯作者: Nagano, Tetsuo

DESIGN AND SYNTHESIS OF THE FLUORESCENCE PROBES FOR GLUTATHIONE S-TRANSFERASE (GST) AND APPLICATION FOR ACTIVITY IMAGING IN LIVE CELLS

谷胱甘肽S-转移酶(GST)荧光探针的设计与合成及其在活细胞活动成像中的应用

• 发表时间: 2008
• 作者: Yuuta Fujikawa;Yasuteru Urano;Hideshi Inoue;Tetsuo Nagano
• 通讯作者: Tetsuo Nagano

Development of fluorescence probe for diagnosis of cancers in early stage

开发用于癌症早期诊断的荧光探针

• 发表时间: 2007
• 作者: Yuuta Fuiikawa;Yasuteru Urano;Hirotatsu Kojima;Koki Morishita;Akira Hasegawa;Koichi Karaki;Hirofumi Matsui;Yoshinori Harada;Tetsuro Takamatsu;Tetsuo Nagano
• 通讯作者: Tetsuo Nagano

Development of high sensitive fluorogenic substrate for the cancer-associated enzyme

癌症相关酶的高灵敏度荧光底物的开发

• 发表时间: 2007
• 作者: Yuuta Fujikawa;Yasuteru Urano;Hideshi Inoue;Tetsuo Nagano
• 通讯作者: Tetsuo Nagano