X0型アマミトゲネズミにおけるX染色体不活性化機構の研究

X0型奄美刺大鼠X染色体失活机制研究

基本信息

  • 批准号:
    18770001
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.37万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
  • 财政年份:
    2006
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2006 至 2007
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

日本の南西諸島に生息するトゲネズミ2種(Tokudaia osimensisおよびTokudaia tokunoshimensis)はY染色体をもたず、雌雄ともにXO型という、極めて稀な性染色体構成をもつ。雌雄ともにX染色体が1本ずつしかないため、トゲネズミには遺伝子量補償の必要性がないと考えられるが、その真偽は明らかではない。本研究は、XO/XO型アマミトゲネズミにおいてX染色体の不活性化が生じているか否かを確認することを目的に以下の研究を行った。・degenerate-PCR法を用いて、トゲネズミゲノムDNAよりXist遺伝子の部分配列を単離した。マウスの配列と比較した結果、90%以上の相同性を確認した。・real-time PCR法により、トゲネズミゲノム中のXist遺伝子のコピー数を定量した結果、雌雄ともに、ハプロイドゲノムあたり1コピーであることが明らかとなった。・得られたXist遺伝子のゲノミッククローンをプローブとして、トゲネズミ染色体にFISHマッピングを行なった結果、X染色体長腕(Xqll)にマッピングされ、1本しかないX染色体上に1コピーが存在することが明らかとなった。・繊維芽細胞由来のmRNAに対してRT-PCRを行ない、Xist遺伝子の発現様式を確認したところ、微量のmPNAが雌雄ともに転写されていることがわかった。以上の結果より、トゲネズミのXist遺伝子はX染色体上に存在し、塩基配列からも機能しうる遺伝子として保存されていると考えられたが、その発現量は微量であり不活性化を担うまでには至らず、トゲネズミにおいて、不活性化機構ははたらいていないと結論づけた。
In South-West Japan, two species of Tokudaia osimensis chromosomes (Tokudaia tokunoshimensis) were isolated from Y chromosome, XO type and sparse sex chromosomes from both sexes. In both sexes, there is a book on the X chromosome, which means that it is necessary to measure the number of children, and that the truth is correct. In this study, XO/ XO type DNA was used to detect X chromosome inactivation, X chromosome inactivation, X chromosome In the degenerate-PCR method, the "isolated" is assigned to the "DNA", "Xist" sub-section. Compare the results of the comparison results and confirm the results of more than 90% of the similarities. In the real-time PCR method, the number of children in Xist was counted. Quantitative results, gender, gender We got the results of Xist chromosomes, FISH chromosomes, long wrists of X chromosome (Xqll), and the presence of one gene on the X chromosome in one book. The origin of the sprout cell is mRNA, the RT-PCR, the Xist, the confirmation, the trace, the mPNA, the male, the female, the female, the female and the female. The results of the above results show that there is a gene on the X chromosome of the Xist gene, and that the machine can be used to save the gene. The results show that there is a significant difference in the results of the above results, the results show that the X chromosome is present on the X chromosome, and the machine can be used to save the gene.

项目成果

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