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ゲノムワイドな視点によるカタユウレイボヤの鰓嚢形成と機能の進化発生学的解析

从全基因组角度对海鞘鳃囊形成和功能进行进化和胚胎学分析

基本信息

批准号：
18770194
负责人：
小笠原道生
金额：
$ 2.37万
依托单位：
Chiba University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

尾索類ホヤの咽頭部に存在する鰓嚢関連形質(鰓裂/鰓孔や鰓嚢血管など)の研究は、後生動物の咽頭構造の起源と進化を考える上で重要である。本研究では、ゲノム解読種として充実した遺伝子情報を持つカタユウレイボヤを研究材料として用い、ゲノムワイドなEST/マイクロアレイデータ解析、各種成体器官を用いたプロテオーム解析、咽頭内胚葉で働くことが知られている分子の類似性に焦点を当てた遺伝子選択、多検体whole-mount in situ hybridization(WISH)法を用いた発現スクリーニングにより、鰓嚢で特徴的に発現する遺伝子の同定を試みた。その結果、鰓嚢の咽頭上皮側の構造物である、縦走血管、横走血管、二次乳頭状突起、背膜において領域的な発現パターンを示す遺伝子を、計27遺伝子を得ることができた。そこで、成体および幼若体の鰓嚢における詳細な発現解析とパターン化を行ったところ、咽頭上皮構造物の形態や形成メカニズムの理解に必要なマーカー遺伝子を絞り込むことができた。さらに、蛍光二重WISH法を用いたマーカー遺伝子の比較発現解析を行ったところ、咽頭上皮構造物の形態的特徴とマーカー遺伝子が発現する細胞集団との位置関係を、直接的に理解することができた。これらの取り組みの結果、横走血管、縦走血管、二次乳頭状突起には分子的背景が異なる細胞集団が複数存在し、それらが特徴的な領域とパターンを形成していることが明らかとなった。また、異なる形態として認識されている横走血管、二次乳頭状突起、背膜におけるマーカー遺伝子の発現が、それぞれ相関したパターンを示すことから、それぞれの形態は類似の分子メカニズムを基盤として持つ可能性がでてきた。その他、小型の気相低温インキュベータ内で手軽にカタユウレイボヤ幼若体を育成できる飼育システムを開発し、ホヤの研究グループにその手法を公開した。

The study on the branchial characteristics of urochordae in pharyngeal head is of great importance to the origin and evolution of pharyngeal structure of metazoan. In this study, we need to analyze the molecular similarity of different kinds of adult organs, and focus on the molecular similarity of embryo leaves in the pharynx. Multi-mode whole-mount in situ hybridization(WISH) method was used to detect the identity of the species. The results show that the structure of the upper epithelium of the head, the blood vessels, the transverse blood vessels, the secondary papillae, and the dorsal membrane have been developed. The detailed analysis of the development of the adult and juvenile tissues is necessary for the understanding of the morphology of the epithelial structures of the pharynx. The morphological characteristics of pharyngeal epithelial structures and the positional relationship between cell clusters and their occurrence were analyzed by using the double WISH method. The results of this selection are as follows: transverse blood vessels, transverse blood vessels, secondary papillary processes, molecular background, multiple cell clusters, characteristic fields, and formation of molecular background. The morphology of the tumor is similar to that of the basal plate, and the molecular morphology of the tumor is similar to that of the basal plate. The development and research methods of other, small and medium temperature systems are disclosed.