B細胞分化・活性化制御機構の解析

B细胞分化/激活控制机制分析

• 批准号: 18790199
• 负责人: 權田 裕之
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18790199/
• 关键词: B細胞活性化; 転写制御因子SIP-1; B細胞分化

申請者は、B細胞の分化・活性化機構の分子メカニズムを癬析する手段として、抗体遺伝子のSHMとCSRに必須な酵素であるAIDの発現が、分化抑制因子Id2と転写因子Pax5によって制御されていることを報告した。この報告の中で、申請者が確立したAID locusのプロモーターアッセイ系が、AID発現をモニタリングするツール、すなわちB細胞の活性化をモニターしうるツールであることを示した。(J ExP Med.,2003)このアッセイ系を用いてB細胞の分化・活性化機構に関与する分子の探索と解析を引き続き行なう過程で、転写制御因子SIP-1がこれらの制御機構に関与していることを申請者は見いだした。(未発表)このSIP-1はCtBPと結合すること、さらにCtBPを含む転写抑制因子複合体を構成する分子群の一員であること、E-cadherinのプロモーター領域を用いたルシフェラーゼアッセイにて転写抑制に働く等の報告から、転写抑制因子として機能すると考えられている。申請者は、このSIP-1遺伝子の欠損マウスをすでに入手済みであり、このマウスを野生型マウスと比較することでB細胞分化・活性化機構におけるSIP-1の役割を解明することを計画している。具体的には、B細胞の初代培養系を用いて(1)CSR誘導アッセイ、(2)B細胞の分化・活性化に関与する遺伝子群のRT-PCR、(3)ゲルシフトアッセイを用いたAID locusへのSIP-1タンパク質の親和性、(4)クロマチン免疫沈降法を用いたAID locusへのSIP-1タンパク質の結合能などを解析中である。

The molecular markers of cellular differentiation and activation of B cells, the molecular markers of SHM, the CSR of antibodies, the expression of enzymes and AID, the inhibitor of differentiation, the writing of Pax5, and the control of the reports of antigens and antigens. In the report, the applicant should make sure that the AID locus