糖尿病に関連性を示したTNFα遺伝子IVS1+123G/A多型の機能解析

TNFα基因IVS1+123G/A多态性与糖尿病相关的功能分析

• 批准号: 18790609
• 负责人: 諏佐 真治
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Yamagata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18790609/
• 关键词: 糖尿病; 遺伝子; ゲノム

1.TNFαIVS1+123GA多型領域に対るエストロゲンの作用の検討:転写因子YY1がIVS1+123G/A多型領域に及ぼす作用に対し、エストロゲンや炎症反応がどのような影響を及ぼすか検討するため、U937細胞株、NIH3T3細胞株をエストロゲンおよびLPS刺激下で培養し、ゲルシフトアッセイ、ルシフェラーゼレポーターアッセイをおこなった。ゲルシフトアッセイではIVS1+123A多型領域にエストロゲン濃度依存性にYY1の結合が変化したが、ルシフェラーゼレポーターアッセイでは、転写活性能に有為な変化を認めなかった。LPS刺激下でエストロゲンの影響を検討したが、同様であり明らかにエストロゲンや炎症反応がIVS1+123G/A多型の違いによって、TNFαの発現に変化を及ぼすことを証明できなかった。2.ヒト単球を用いたTNFαIVS1+123G/A多型領城のYY1結合の証明:健常人提供者より末梢血を採取し、密度勾配遠心法により単核球を分離。これをもちいてYY1の多型領域への結合を、クロマチン免疫沈降アッセイにて検討した。多型によって結合能の違いをクロマチン免疫沈降アッセイで証明できなかった。提供者の多型にG/AヘテロタイプはいたがA/Aホモタイプがいなかったことも原因と考える。3.TNFαIVS1+123G/A多型の臨床応用の検討:舟形住民検診の検体を用いて、IVS1+123G/A多型領域と血清アディポネクチンの濃度、およびその他の身体計測項目、血液生化学データとの相関を検討した。75gGTTにて正常耐糖能を示した住民を対象とし、IVS1+123G/A多型の違いで臨床データを統計学的に検討した。血清アディポネクチンがIVS1+123G多型で補正後、有為に低下しており、IVS1+123G/A多型がTNFαの発現に影響を及ぼし、脂肪組織のアディポネクチン産生に影響を与えていることが示唆された。

1. The field of TNF alpha IVS1 + 123 ga polymorphism に る seaborne エ ス ト ロ ゲ ン の role の 検 beg: planning write factor YY1 が IVS1 + 123 g/A polymorphism に and ぼ す role に し, seaborne エ ス ト ロ ゲ ン や anti inflammation 応 が ど の よ う な influence を and ぼ す か beg す 検 る た め, U937 cell lines and NIH3T3 cell lines を エ ス ト ロ ゲ ン お よ び LPS stimulation under で し, ゲ ル シ フ ト ア ッ セ イ, ル シ フ ェ ラ ー ゼ レ ポ ー タ ー ア ッ セ イ を お こ な っ た. ゲ ル シ フ ト ア ッ セ イ で は IVS1 more than + 123 a type field に エ ス ト ロ ゲ ン concentration dependence に YY1 の combining が variations change し た が, ル シ フ ェ ラ ー ゼ レ ポ ー タ ー ア ッ セ イ で は, planning can write activity に for な variations change を recognize め な か っ た. LPS stimulation under で エ ス ト ロ ゲ ン の influence を beg し 検 た が, with others in で あ り Ming ら か に エ ス ト ロ ゲ ン や anti inflammation 応 が IVS1 + 123 g/A polymorphism の violations い に よ っ て, TNF alpha の 発 に now - を and ぼ す こ と を prove で き な か っ た. 2. The ヒト単 globulin を was demonstrated by the combination of <s:1> たTNFαIVS1+123G/A multitype <s:1> YY1 and <s:1>. It was proved that the よ peripheral blood を of a healthy person provider was separated from the nuclear globulin by the <s:1> density matching cardiocentric method によ <s:1> 単 を. こ れ を も ち い て YY1 の polymorphism field へ の を, ク ロ マ チ ン immune sink ア ッ セ イ に て beg し 検 た. Polymorphism に よ っ て binding energy の violations い を ク ロ マ チ ン immune sink ア ッ セ イ で prove で き な か っ た. Provider の polymorphism に G/A ヘ テ ロ タ イ プ は い た が A/A ホ モ タ イ プ が い な か っ た こ と も reason と exam え る. 3. TNF alpha IVS1 + 123 g/A polymorphism の clinical 応 の 検 beg: boat shaped billet 検 diagnosis の を 検 body with い て, IVS1 + 123 g/A polymorphism field と serum ア デ ィ ポ ネ ク チ ン の concentration, お よ び そ の の his body measuring project, blood biochemistry デ ー タ と の phase masato を beg し 検 た. 75 GGTT に て normal sugar can を resistance in し た inhabitants を like と seaborne し, IVS1 + 123 g/A polymorphism の violations い で clinical デ ー タ を statistical に beg し 検 た. Serum ア デ ィ ポ ネ ク チ ン が IVS1 + 123 g polymorphism で after correction is made, for low に し て お り, IVS1 + 123 g/A polymorphism が TNF alpha の 発 に influence を and now ぼ し, adipose tissue の ア デ ィ ポ ネ ク チ ン に impact を and え て い る こ と が in stopping さ れ た.

项目成果

TNFα遺伝子イントロン1の多型IVS1+123G/Aの機能解析

TNFα基因内含子1多态性IVS1+123G/A的功能分析

• 发表时间: 2007
• 作者: Susa;Shinji;諏佐真治
• 通讯作者: 諏佐真治

A functional polymorphism of the TNF-alpha gene that is associated with type 2 DM.

与 2 型糖尿病相关的 TNF-α 基因的功能多态性。

• 发表时间: 2008
• 期刊: Biochem Biophys Res. Commun. 369
• 作者: Susa;Shinji
• 通讯作者: Shinji