小型霊長類コモンマーモセットES細胞を用いた新規輸血療法開発の為の前臨床研究

利用小型灵长类普通狨猴 ES 细胞开发新型输血疗法的临床前研究

• 批准号: 18790657
• 负责人: 栗田 良
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18790657/
• 关键词: 霊長類 ES 細胞; 輸血療法; 遺伝子導入; コモンマーケット; ES細胞; 赤血球; 血小板; tal1; scl

本年度は特にコモンマーモセット(CM)ES-tall/scl細泡株からの血小板分化誘導系に重点を置き、1.巨核球・血小板産生系における最適培養条件の検討、及び2.電子顕微鏡法を用いた形態学的解析を試みた。1-(1)培養液の検討:分化誘導後14日目のCD41陽性細胞数を指標とし、最適培養液の検討を行った。その結果、従来使用していた血清入りの培養液よりもビタミンB_<12>・葉酸等を添加した無血清培地の方がより効率良く分化誘導が行えること力明らかとなった。1-(2)巨核球・血小板関連遺伝子導入による検討:tall/scl遺伝子に加えて巨核球・血小板関連遺伝子であるgatal,nf-e2,runxlc各遺伝子をES細胞分化誘導時に同時導入し、巨核球・血小板産生能の検討を行った。しかし昨年度行った単一遺伝子導入時と同様に、巨核球・血小板産生能の顕著な効率化は観察されなかった。2-(1)電子顕徴鏡法を用いたCM末梢血血小板の形態学的解析:予備実験として、CM末梢血血小板を用いた電子顕微鏡解析を行った。ヒト末梢血血小板での報告をもとに各種条件設定(血小板分離方法、電子顕微鏡解析用固方法血小板活性化試薬の条件等)を検討し、ヒトと類似したCM血小板構造を観察した。また、抗vWF抗体を用いた免疫電子顕微鏡解析を行い、ADP及びトロンビン刺激により活性化する血小板像を観察した。2-(2)電子顕微鏡法を用いたCM ES細胞由来血血小板の形態学的解析:上記の条件を用いてCMES細胞由来血小板様構造物の電子顕微鏡解析を行った。その結果、血小板様の構造は観察されたものの、免疫電子顕微鏡解析や細部にわたる構造解析においてCM血小板と同定するまでには至らなかった。【まとめ】CMES細胞分化誘導系において血小板様の産生物が確認できたが、現段階では産生効率が悪く、今後さらなる高効率分化誘導系の構築が必要である。

This year's key points are the platelet differentiation induction system of ES-tall/scl vesicle strain (CM), 1. Discussion of optimal culture conditions for megakaryocytes and platelet-producing systems, and 2. Analysis of morphology using electron microscopy. 1-(1) Culture solution: The number of CD41-positive cells at 14 days after differentiation induction is an indicator and the optimum culture solution is used.その results, use していた serum into りの culture medium よりもビタミンB_<12>・folic acid, etc.をThe addition of serum-free tertiary medicine has good efficiency and differentiation induction, and the force is bright and clear. 1-(2) Megakaryocyte・Platelet-Related Recommendation による検 Discussion:tall/scl 伝子に加えて Megakaryocyte・Platelet-Related Relic Servant であるg Atal, nf-e2, and runxlc can be introduced simultaneously when ES cell differentiation is induced, and megakaryosphere and platelet production can be carried out. Yesterday's line of work last year was carried out with the introduction of the same swine, megakaryocyte and platelet production energy, and the efficiency of the production was improved. 2-(1) Morphological analysis of CM peripheral blood platelets using electron microscopy: Preliminary preparation of CM peripheral blood platelet analysis using electron microscopy.ヒトPeripheral blood platelet monitoring report and をもとに Various condition settings (platelet separation method, solid method platelet activation test for electron microscopy analysis, conditions, etc.), を検し, ヒトとsimilar to したCM platelet structure inspection and testing.また, anti-vWF antibody was analyzed using いたimmunoelectron microscopy, を行い, ADP and びトロンビン stimulated により activated する platelet image was observed. 2-(2) Morphological analysis of blood platelets derived from CM ES cells using electron microscopy: The conditions mentioned above were analyzed using electron microscopy of platelets derived from CMES cells.その results, platelet 様のstructural inspection, immunoelectron microscopy analysis details Department of structural analysis of においてCM platelet と同定するまでには to らなかった. 【まとめ】The CMES cell differentiation induction system is necessary to confirm the production of platelets and the production efficiency at this stage. It is necessary to construct a high-efficiency differentiation induction system in the future.

项目成果

Construction of a high performance lentiviral cDNA library derived fromhuman fetal liver

人胎肝高性能慢病毒cDNA文库的构建

• 发表时间: 2007
• 作者: Kurita;R.・Tani;K.;et. al.
• 通讯作者: et. al.

TARC and RANTES enhance antitumor immunity induced by the GM-CSF-transduced tumor vaccine in a mouse tumor model

TARC 和 RANTES 增强小鼠肿瘤模型中 GM-CSF 转导的肿瘤疫苗诱导的抗肿瘤免疫

• 发表时间: 2008
• 期刊: Cancer Immunol Immun 57
• 作者: Inoue;H.;Iga;M.;Tani;K.;et.al.
• 通讯作者: et.al.

Cronkhite-Canada syndrome associated with schizophrenia

• DOI: 10.2169/internalmedicine.46.1735
• 发表时间: 2007-01-01
• 期刊: INTERNAL MEDICINE
• 影响因子: 1.2
• 作者: Nakayama, Masaharu;Muta, Hiromi;Tani, Kenzaburo
• 通讯作者: Tani, Kenzaburo

Familial Turner mosaicism 46XX/45XO with brain calcifcation.

家族性特纳嵌合体 46XX/45XO 伴有脑钙化。

• 发表时间: 2007
• 期刊: J Neuropsychiatry Clin Neurosic. 19
• 作者: Maeda;T;et. al.
• 通讯作者: et. al.

The Effects of Mutations in the Carboxyl-Terminal Region on the Catalytic Activity of Escherichia coli Signal Peptidase I.

羧基端区域突变对大肠杆菌信号肽酶 I 催化活性的影响。

• 发表时间: 2008
• 期刊: J Biochem. 143
• 作者: Kim;YT;et. al.
• 通讯作者: et. al.