細胞膜透過型タンパク製剤を用いた関節炎の細胞周期制御療法の研究

利用细胞膜穿透蛋白制剂进行细胞周期调控治疗关节炎的研究

• 批准号: 18790676
• 负责人: 中里 款
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18790676/
• 关键词: 関節リウマチ; 生物学的製剤; 自己免疫; CDKI; リウマチ; 創薬; ドラッグデリバリー; 細胞周期; 炎症; プロテオミクス

本研究においては関節リウマチ(RA)の病態を抑制するため、RA関節滑膜においてみられる滑膜の異常増殖を、サイクリン依存性キナーゼ阻害因子(CDKI)を用いて直接抑制する新規治療法の開発を目的としている。これまでに申請者の所属する研究室ではアデノウィルスベクターを用いたCDKI遺伝子治療が関節リウマチの動物モデルに対し著効することを明らかとしたが、アデノウィルスは安全性に克服すべき点があり臨床応用が困難視されているため、本研究では細胞膜透過性を付与した新規CDKI生物学的製剤の開発を行った。昨年度までの研究では細胞膜透過性ペプチドTAT-PTDとp27^<Kipl> CDKIの融合タンパクTAT-p27を作成し、これがRA関節滑膜線維芽細胞(RSF)に対しきわめて高い導入効率を示し、これがRSFの増殖を停止させること、関節破壊に関わるマトリックスメタロプロテアーゼ(MMP)-3の産生を抑制することなどin vitroにおける生理活性について明らかとした。今年度はこのTAT-p27を用い、関節リウマチモデル動物を用いてin vivoにおける治療効果について検討した。関節リウマチモデルであるコラーゲン誘導性関節炎をDBA/1Jマウスに誘導し、追加免疫から3日後から関節炎発症を認めたマウスに対してTAT-p27および不活性型変異型であるTAT-p27mutを一日おきに関節内注射により投与した。その結果、TAT-p27投与群ではTAT-p27mut群に比べ有意に関節炎スコアが減少した。この結果はTAT-p27が関節リウマチ動物モデルに対し治療効果を有する事を示すとともにTAT-PTDによる細胞膜透過がRA滑膜に対する薬剤デリバリーシステムとして有用である事を示唆する。

在这项研究中，我们旨在开发一种新型的治疗方法，该方法通过使用依赖细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂（CDKI）直接抑制类风湿关节炎（RA）的病理。到目前为止，申请人属于的实验室表明，使用腺病毒载体的CDKI基因疗法对类风湿关节炎的动物模型显着有效，但是腺病毒病毒被认为很难在临床上使用，因为它们需要克服安全性，因此这项研究开发了一种新型的CDKI生物学产品，该产品已赋予了一种新型的CDKI生物学产品。直到去年的研究创建了一种融合蛋白Tat-P27，这是一种细胞膜可渗透肽Tat-Ptd和P27^<Kipl> CDKI，它显示出极高的转导效率，用于RA关节型成纤维细胞（RSF），并揭示了其在体外的生理活性，例如停止了RSF和RS抑制作用RSF的成果。 （MMP）-3，涉及关节破坏。今年，我们使用TAT-P27使用类风湿关节炎的动物模型来研究体内治疗效果。胶原蛋白引起的关节炎是一种类风湿关节炎模型，在DBA/1J小鼠中诱导，并在助推器免疫后三天被诊断出患有关节炎的小鼠TAT-P27和无效突变体Tat-P27MUT每隔几天通过对小鼠的体内造成的症状症状，以使已有炎的小鼠在经过三天的炎后进行炎。结果，与TAT-P27MUT组相比，TAT-P27组的关节炎评分显着降低。该结果表明TAT-P27对类风湿关节炎的动物模型具有治疗作用，并表明TAT-PTD的细胞膜渗透是可作为RA Synovium的药物输送系统。

项目成果

The gene delivery system for rheumatoid synovium.

类风湿滑膜的基因传递系统。

• 发表时间: 2008
• 期刊: Nihon Rinsho Meneki Gakkai Kaishi 31(1)
• 作者: Nakasato. M.;Nonomura. Y.;Miyasaka. N. anD Kohsaka. H.
• 通讯作者: Miyasaka. N. anD Kohsaka. H.

Preparation of a TAT-PTD CDKI fusion protein that efficiently inhibits proliferation and MMP-3 production of rheumatoidsynovial fibroblasts.

高效抑制类风湿滑膜成纤维细胞增殖和MMP-3产生的TAT-PTD CDKI融合蛋白的制备。

• 发表时间: 2007
• 作者: 中里 款;野々村美紀;宮坂信之;上阪 等,
• 通讯作者: 上阪 等,