難治性急性前骨髄性白血病に対する新規レチノイド化合物探索法に関する研究

治疗难治性急性早幼粒细胞白血病的新型维A酸类化合物寻找方法的研究

基本信息

批准号：
18790739
负责人：
井上彰子
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Osaka Medical College
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18790739/
关键词：
急性前骨髄性白血病レチノイン酸療法転写共役因子

项目摘要

急性前骨髄性白血病(acute promyelocytic leukemia、以下APL)のa11-trans retinoic acid(以下ATRA)療法は、染色体異常に伴うPML/RAR融合遺伝子を標的とした分子標的療法である。分化誘導療法のメカニズムとして、PML/RAR融合遺伝子と相互作用する転写共役因子の存在が重要である。転写共役因子とはレチノイン酸受容体(RAR)などの受容体と相互作用し、転写レベルで標的遺伝子の発現を調節する蛋白質である。これには転写を促進する因子、抑制する因子などがある。APLではPML/RAR融合蛋白質および抑制系の転写共役因子が、複合体を形成することで、正常な転写が抑制され、癌化することが考えられる。しかし詳細については解明されてない点が多い。変異PML/RAR融合遺伝子はATRA耐性となる。このとき、転写共役因子群との相互作用の変化がおこることが考えられる。そこでATRA耐性細胞における転写共役因子の動態について検討することを試みる。(1)発現ベクターの構築変異PML/RAR遺伝子(mPML/RAR)および転写共役因子の発現ベクターを構築した。転写共役因子は、転写促進共役因子(SRC-1, TIF-2, CBP, p300)および抑制系共役因子(N-CoR)を用いる。(2)変異PML/RAR遺伝子の結合実験mPML/RARと転写共役因子との結合をプルダウン法にて行う。現在、条件を検討している。(3)DNA結合実験mPML/RARと転写共役因子の複合体が、RAR応答配列に結合するか否かを、ゲルシフトアッセイを用いて検討する。現在、条件を検討中である。

急性前临床白血病（APL）的A11型反毒酸（ATRA）治疗是一种靶向PML/RAR融合基因与染色体异常相关的分子靶向疗法。与PML/RAR融合基因相互作用的转录耦合因子的存在至关重要，这是诱导分化疗法的机制。转录耦合器是与视黄酸受体（RARS）相互作用的蛋白质，并调节转录水平的靶基因的表达。这些包括促进和抑制转录的因素。在APL中，人们认为PML/RAR融合蛋白与抑制剂系统的转录转换因子之间的复合物的形成会导致正常转录受到抑制和癌性。但是，有许多细节尚未澄清。突变的PML/RAR融合基因成为抗ATRA。目前，人们认为将发生与转录共价因子组的相互作用。因此，我们尝试研究ATRA耐药细胞中转录库弗因子的动力学。（1）构建表达载体突变pml/rar基因（mpml/rar）和转录耦合器的表达矢量。转录凝血因子包括转录促进凝血因子（SRC-1，TIF-2，CBP，P300）和抑制性凝血因子（N-COR）。（2）使用下拉方法进行MPML/RAR和转录时装因子之间结合突变体PML/RAR基因的结合实验。目前，正在考虑条件。（3）DNA结合实验是否将使用凝胶移位测定法研究了MPML/RAR和转录Couver因子与RAR响应序列的结合。目前正在考虑条件。